background image

Определение основных групп биологически активных веществ

  

Тонкослойная хроматография 

Приготовление растворов. 

Раствор для детектирования 1. 

Дифенилборилоксиэтиламина раствор 

спиртовой 1

 %.

 

1,0 г дифенилборилоксиэтиламина (дифенилборной кислоты 

аминоэтилового  эфира)  растворяют  в  100

 

мл  спирта  96  %.  Срок  годности 

раствора не более 3 мес. при хранении в прохладном, защищенном от света 

месте.

 

Раствор для детектирования 2. 

Полиэтиленгликоля (ПЭГ) 400 раствор 

спиртовой 5 %. 5

 

мл ПЭГ смешивают со 100 мл спирта 96 %. Срок годности 

раствора не более 6 мес. при хранении в прохладном, защищенном от света 

месте.

 

Раствор  стандартного  образца  (СО)  хлорогеновой  кислоты. 

Около 

0,005 

г хлорогеновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96

 

% и перемеши-

вают. Срок годности раствора не более 3 мес. при хранении в прохладном, 

защищенном от света месте.

 

 

Аналитическую пробу сырья измельчают

 

до величины частиц, прохо-

дящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Около 2,0

 

г измельченного 

сырья  помещают  в  колбу  вместимостью  100

 

мл,  прибавляют  10

 

мл  спирта 

96 

% и нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температу-

ре 60 

°

С в течение 

10 

мин. После охлаждения извлечение фильтруют через 

бумажный фильтр (испытуемый раствор).

 

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля в 

виде полос длиной 10

 

мм, шириной не более 3

 

мм наносят 30

 

мкл (0,03 мл) 

испытуемого  раствора  и  параллельно  20

 

мкл  (0,02  мл)  раствора  СО 

хлорогеновой кислоты. 

 

Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре в 

течение  5

 

мин,  помещают  в  камеру  (выложенную  изнутри  фильтровальной 

бумагой

)

, предварительно насыщенную в течение не менее 40

 

мин со смесью 

растворителей  этилацетат

 – 

муравьиная  кислота  безводная

 – 

вода

 (80:10:10), 

и  хроматографируют  восходящим  способом.  Когда  фронт  растворителей 
пройдет  около  80

 – 

90  %  длины  пластинки  от  линии  старта,  пластинку 

вынимают из камеры

 

и

 

сушат до удаления

 

следов растворителей.

 

Затем  пластинку  последовательно  опрыскивают

 

дифенилборилокси

6296