background image

1.

 

Тонкослойная хроматография 

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем 

силикагеля наносят 

10 

мкл настойки и 5

 

мкл раствора СО рутина

 

(см. раздел 

«Количественное  определение»

раствор

 

А  СО  рутина)

Пластинку  с 

нанесенными

 

пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно 

насыщенную  в  течение  не  менее  1

 

ч  смесью  растворителей  этилацетат 

– 

муравьиная  кислота 

– 

вода    (80:10:10)  и  хроматографируют  восходящим 

способом.

 

После  прохождения  фронта  растворителей 

80 – 90 % 

длины 

пластинки  от  линии  старта,

 

пластинку  вынимают

 

и  оставляют  под  тягой  до

 

удаления  следов

 

растворителей

После  высушивания  пластинку 

просматривают в УФ

-

свете при

 

длине волны 

365 

нм

 

в течение 

30-40 

мин.

 

На  хроматограмме

 

раствора  СО  рутина

 

обнаруживается  зона  адсорбции 

коричневого

 

цвета

На  хроматограмме  настойки  должны  присутствовать

 

зона

 

адсорбции

 

коричневого цвета на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора СО 
рутина,  а  также  зоны  голубовато

-

зеленого,  светло

-

зеленого,  голубого, 

коричневого,  ярко  голубого

 

и  красного

 

цвета

 

(флавоноиды,

 

кумарины,

 

фенолкарбоновые кислоты)

Допускается присутствие дополнительных зон. 

 

2. 3 

мл настойки упаривают до 1

 

мл на водяной бане, разбавляют водой в 

соотношении  1:2  и  обрабатывают  последовательно  в  делительной  воронке  3 
раза петролейным эфиром (объемом по 2

 

мл). Водную (раствор А) и эфирную 

(раствор Б

фазы

 

отделяют друг от друга.

 

 

мл раствора Б

 

выпаривают

 

досуха

 

и остаток растворяют в

 1 

мл спирта

 

96 %

.  К  полученному  раствору  добавляют  несколько  капель  натрия 

гидроксида раствора 5

 %

. Раствор приобретает желтый цвет. Затем к раствору 

прибавляют  несколько  капель  диазореактива.  Раствор  приобретает  красно

-

оранжевую окраску (кумарины).

 

3.

 

К  2

 

мл  раствора  А

 

и  раствора  Б

 

добавляют  по

  0,5 

мл 

хлористоводородной  кислоты  концентрированной  и  0,03

-0,05 

г  цинковой 

пыли.  При  нагревании  в  растворе  А

 

появляется  интенсивное  розовое 

6788