background image

Раствор  стандартного  образца  (СО)  кукурбитацина Е.

 

Около  2,0

 

мг 

(точная  навеска)  СО  кукурбитацина

 

Е

 

 

помещают  в  мерную  колбу 

вместимостью 10

 

мл, прибавляют 4

 

мл метанола, перемешивают до полного 

растворения, доводят объем раствора метанолом до метки, перемешивают.

 

Срок  годности  растворов  не  более  3

сут

 

при  хранении  в  плотно 

укупоренной таре в прохладном, защищенном от света месте.

 

Проверка пригодности хроматографической системы

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются 

следующие условия:

 

относительное 

стандартное 

отклонение 

площади 

пика 

кукурбитацина

 

Е должно быть не более 2,0 %; 

 

фактор асимметрии пика кукурбитацина

 

Е должен быть не более 2,0;

 

эффективность  хроматографической  колонки,  рассчитанная  по  пику 

кукурбитацина Е, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.

 

 

Около 

5,0 

г  (точная  навеска)  настойки  фильтруют  через  нейлоновый 

фильтр  (с  размером  пор  0,45

 

мкм)

 

в  мерную  колбу,  вместимостью  5

 

мл

 

и 

доводят спиртом 

90 

% до метки (испытуемый раствор

).  

Условия хроматографирования

 

Колонка

 

 

 

150 × 4,6 

мм, 

октадецилсилилсиликагель (С

18

для 

хроматографии

, 3 – 10 

мкм;

 

 

Подвижная фаза

 

А 

вода для хроматографии;

 

Б 

ацетонитрил для хроматографии;

 

Способ элюирования

 

программа градиента

 

Время (мин)

 

А, об. %

 

В, об. %

 

0 – 2 

80 

20 

2 – 22 

80 → 40

 

20 → 60

 

22 – 23 

40 → 80

 

60 → 20

 

23 – 28 

80

 

20

 

 

Скорость потока, мл

/

мин

 

 1,5  

Температура колонки, 

о

С

 

 35  

Детектор

 

УФ

-

спектрофотометрический 

 

Длина волны, нм

 

 270 

6820