background image

линией, которая должна располагаться по оси ординат в пределах 3 мм² от 
стандартной  кривой.  Если  расстояние  между  начальными  точками 
тестируемого и стандартного антигена превышает 3 мм², такие результаты не 
учитывают; в этом случае необходимо более точно подобрать концентрации 
антисыворотки    и  антигенов.  Затем  на  оси  ординат  между

 

начальными 

точками  кривой  стандарта  и  каждого  антигена  находят  среднюю  точку,  от 
нее  проводят  прямую,  параллельную  оси  абсцисс,  а  от  нее  на  уровне 
разведения  1:3  находят  расстояния  до  кривой  тестируемого  антигена  и 
стандартного

Количество  ГА  (Х)  в  вакцине  в  мкг/мл  рассчитывают  по 

формуле: 

 

L

x

 

      Х 

=  ̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

 

̶

  

·

 

· 

 

b,

 

L

CT 

где:

 

L

х

, L

ст

 – 

расстояния по перпендикуляру на уровне разведения 1:0 

от срединной линии до пересечения с кривыми тестируемого и стандартного 

антигенов, соответственно;

 

a

 – 

содержание ГА в мкг/мл в стандарте;

 

b

 – 

предварительное разведение вакцины

 

 

Учет  результатов  ОРИД  можно  проводить,  используя  программное 

обеспечение. Методика должна быть валидирована.

 

Примечания

 

 
     

Приготовление  моноспецифической  сыворотки  к  ГА.

 

Делают 

разведение водой очищенной

 

до объема, указанного на ампуле; последующие 

разведения делают

 

с помощью ФБР.

 

     

Приготовление  стандартного  антигена.  Делают  разведение  водой  в 

объеме,  указанном  на  ампуле;  дальнейшие  разведения  делают  с  помощью 

ФБР. Разведенный

 

антиген хранят при температуре 4 

°

С не более 6 ч.

 

     

Приготовление  агарозы.  Агарозу  заливают  ФБР  (конечная 

концентрация  1,5

 

%)  и  нагревают  в  кипящей  водяной  бане  до  полного 

растворения. Расплавленную агарозу фильтруют в горячем виде через ватно

-

марлевый фильтр, разливают по 12 мл в пробирки и закрывают резиновыми 

пробками. В таком виде агароза может храниться более 3 мес. при комнатной 

температуре  (если  агароза  начинает  отделяться

 

от  стенок  пробирки,  ее  не 

используют).

 

5415