background image

Суммарное содержание антигена ВГА в вакцине (

N

1

 

и 

N

2

) должно быть 

не  менее  320  ИФА  единиц  в 

дозе  вакцины  для  взрослых  и  не  менее  160 

ИФА единиц

 

в 

дозе вакцины для детей.

 

Примечание

 

Приготовление буферного раствора для десорбции

В градуированную 

посуду  вместимостью  50  мл

 

помещают  50  мг  желатина, 7,16  г  натрия  фос-

форнокислого двузамещенного, 55 мг трилона 

 

Б

 

(ЭДТА), 50 мкл твина

-

20 и 

растворяют в 40 мл воды очищенной, доводят объем раствора водой до метки 

и перемешивают.

 

Раствор хранят при комнатной температуре не более 1

 

мес. 

 

 

Определение иммуногенной активности ВГА  

 

Вакцина должна индуцировать

 

образование

 

антител

 

к

 

вирусу

 

гепатита 

А у однократно

 

иммунизированных

 

белых нелинейных мышей

 

(самцов)

 

мас-

сой 

18 

 

20  г

Определение  содержания  антител  к  ВГА  в

 

сыворотке  крови 

мышей  проводят  методом  ИФА  с  определением  ИД

50

которая

 

должна

 

со-

ставлять не менее 

6. 

В качестве образца сравнения используют СО вакцины. 

Отношение  ИД

50

 

в испытуемой  вакцине  к  ИД

50 

в  СО должно  находиться в 

пределах от 0,

33 

до 

3 (

=  0,95) 

при статистической

 

обработке результатов 

методом параллельных линий.

 

Метод основан на определении дозы вакцины, способной вызвать

 

обра-

зование антител к вирусу гепатита А у 50

 

% мышей

Для проведения теста готовят серию разведений

 

испытуемого образца

 

и СО

 

вакцины от 1:2 до 1:32

Для разведения используют плацебо, в состав 

которого входит

 

0,01 М фосфатно

-

солевой

 

буферный

 

раствор 

рН 7,0 

7,6 ) и 

гель

 

алюминия гидроксида в концентрации от 0,35 до 0,65 мг/мл (по А1

+3

). 

Методом случайной выборки формируют опытные и

 

контрольную

 

группы по 

10 мышей в каждой.

 

Дополнительно

 

10 мышей оставляют интактными. Ко-

личество опытных групп должно соответствовать количеству используемых 
разведений

Мышам опытных групп вводят разведения вакцины в объеме 1 мл под-

кожно  в 

точки,  используя 

разведение  препарата  на 

опытную  группу. 

Мышам контрольной группы по той же схеме и тем же способом вводят пла-

5423