background image

Активность ЦПА определяют с иммуноглобулином противосибиреязвен-

ным лошадиным, действующего срока годности. Титр ЦПА должен составлять 
не менее 1:8. 

 

Примечания

 

 

Приготовление 1/15 М фосфатного буферного раствора рН 7,2

-7,3. 

 

Приготовление 0,052 М

  

раствора калия фосфорнокислого однозамещен-

ного (КН

2

РО

4

). 

В

  

мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 9,07 г калия 

фосфорнокислого

 

однозамещенного, растворяют в воде очищенной, перемеши-

вают

доводят объем раствора водой до метки

 

и вновь перемешивают

Приготовление  0,084  М  раствора  натрия  фосфорнокислого  двузамещен-

ного двуводного (

Na

2

HPO

4

·2

H

2

O).

 

В мерную колбу вместимостью 1000 мл по-

мещают 11,87 г натрия фосфорнокислого

 

двузамещенного двуводного, раство-

ряют в воде очищенной, перемешивают

доводят объем раствора водой до мет-

ки

 

и вновь перемешивают

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 29,6 мл 0,052

  

М раствора 

калия  фосфорнокислого  однозамещенного,  доводят  объем  раствора  0,084  М

  

раствором  натрия  фосфорнокислого  двузамещенного  двуводного  до  метки  и 

перемешивают.

 

Приготовление агарового

 

геля.

 

К 1

 

л фосфатного буферного раствора до-

бавляют  15  г  агара  микробиологического,  автоклавируют  при  температуре 

(115

±

2) ºС в течение 15

 

мин и в горячем состоянии осветляют центрифугирова-

нием при 1000 

в течение 5 мин. Осветленный центрифугированием агар раз-

ливают слоем толщиной 6,0 мм в чашки Петри, помещенные на горизонталь-

ную поверхность. После застывания агарового геля чашки Петри помещают в 

эксикатор,  на  дно  которого  наливают  100  мл  воды  очищенной  и  хранят  при 

температуре от 2 до 8

 

ºС не более 5 сут.

 

 

Определение активности препарата в РДП с сибиреязвенным ЦПА

 

В  слое  агара  специальным  штампом

-

пробойником  вырезают  одну  цен-

тральную и шесть радиальных лунок, расстояние между центрами которых, со-
ставляет 10 мм. Остатки агара из лунок удаляют с помощью вакуума. Готовят 
разведения  испытываемого  иммуноглобулина  противосибиреязвенного  лоша-
диного 1:20, 1:40, 1:60, 1:80 до 1:100 и вносят в периферические лунки при по-
мощи пипетки с тонким капилляром по 0,04 мл, начиная с разведения 1:100, в 
центральную  лунку  вносят  сибиреязвенный  ЦПА.  В  качестве  контроля  в  ше-
стую радиальную лунку вносят сыворотку лошадиную нормальную.

 

5806