background image

Определение основных групп биологически активных веществ 

Приготовление растворов. 

Раствор СО рутина.

 Около 0,005 г СО рутина (рутина тригидрата) раство-

ряют в 10 мл спирта 96 % и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 ме-

сяцев при хранении в прохладном, защищенном от света месте. 

Тонкослойная хроматография 

На  линию  старта  аналитической  хроматографической  пластинки  со  слоем 

силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 5 мкл (0,005 мл) испытуемого 
раствора А (см. раздел «Количественное определение»), рядом - 5 мкл (0,005 мл) 
раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат, помещают в каме-
ру со 

смесью растворителей 

(без предварительного насыщения) этилацетат - му-

равьиная кислота безводная - вода (10:2:3) и хроматографируют восходящим спо-
собом. Когда фронт растворителей пройдет 80 

 90 % длины пластинки от линии 

старта,  ее  вынимают  из  камеры,  сушат  до  удаления  следов  растворителей  и  про-
сматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. 

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорб-

ции сине-фиолетового цвета. 

На хроматограмме раствора А должна обнаруживаться сине-фиолетовая зона 

адсорбции  на  уровне  зоны  адсорбции  СО  рутина,  одна  зона  адсорбции  сине-
фиолетового  цвета  ниже  зоны  адсорбции  СО  рутина,  две  зоны  адсорбции  сине-
фиолетового цвета выше зоны адсорбции СО рутина (флавоноиды). 

Затем пластинку обрабатывают алюминия хлорида спиртовым раство-

ром 1 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре             100 – 
105 °С в течение 2 – 3 мин и просматривают УФ-свете при длине волны 365 
нм. 

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорб-

ции с флюоресценцией желто-зеленого цвета. 

На  хроматограмме  раствора  А  должны  обнаруживаться    зоны  адсорбции  с 

желто-зеленой флюоресценцией: одна – на уровне зоны адсорбции СО рутина, од-
на – ниже зоны адсорбции СО рутина и две зоны выше зоны адсорбции СО рутина 
(флавоноиды). 

5999