Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 3

Подвижная фаза (ПФ

). Ацетонитрил

—

метанол

—

щавелевой кислоты

раствор

6,3

%, доведённый до рН

2±0,1

аммиака раствором

концентрированным

20:20:60.

Испытуемый раствор

Растворяют

5,0

мг субстанции в 10

мл

метанола.

Стандартный раствор А.

Растворяют

5,0

мг стандартного образца

тетрациклина гидрохлорида в 10

мл метанола.

Стандартный раствор Б.

Растворяют

5,0

мг стандартного образца

тетрациклина гидрохлорида, 5

мг демеклоциклина гидрохлорида и 5 мг

окситетрациклина гидрохлорида в 10

мл метанола.

Раствор для проверки пригодности хроматографической

системы

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора,
стандартного раствора А

и стандартного раствора Б.

Пластинку с

нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около

80–90

% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на

воздухе до удаления следов растворителей, и просматривают в УФ

свете при

254 нм.

Пригодность хроматографической системы.

На хроматограмме

стандартного раствора Б должны наблюдаться три четко разделенных

зоны

адсорбции.

Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по

положению

и совокупности

интенсивности поглощения и величины

должна

соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме стандартного
раствора А.

2. Качественная реакция

. К 50 мг

субстанции

прибавляют 2

мл

серной кислоты

концентрированной; появляется фиолетовое окрашивание,

прибавляют

мл

воды; окраска становится тёмно

жёлтой; при добавлении

капли железа(III) хлорида раствора 3 % окраска переходит в коричневую или
красно

коричневую.