background image

2. Тонкослойная хроматография 

(ОФС «Тонкослойная хроматография»)

.  

Пластинка. 

ТСХ пластинка со слоем силикагеля

.

 

Подвижная фаза (ПФ). 

Уксусная

 

кислота 

– 

вода 

– 

бутанол

 20:20:60. 

Испытуемый раствор А

. 0,1 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

 

Испытуемый  раствор  Б

.  1,0  мл  испытуемого  раствора  А

 

разбавляют  до 

10,0 

мл водой.

 

Раствор  сравнения  А. 

10  мг  стандартного  образца  глицина  растворяют  в 

10,0 

мл воды.

 

Раствор  сравнения  Б

. 1,0 

мл

 

испытуемого  раствора  А

 

доводят  водой  до 

200,0 

мл. 

 

Раствор  сравнения  В

.  10  мг  стандартного  образца  глицина  и  10  мг 

стандартного  образца  аланина  растворяют  в  воде  и  доводят  объём  водой  до 

25,0 

мл.

 

На  линию  старта  пластинки  наносят  по  5  мкл  испытуемого  раствора  и 

растворов  сравнения.  Пластинку  с  нанесёнными  пробами  сушат  на  воздухе, 
помещают  в  камеру  с  ПФ  и  хроматографируют  восходящим  способом

Когда 

фронт  подвижной  фазы  пройдет  около  80 

– 

90  %  длины  пластинки  от  линии 

старта, ее вынимают из камеры, сушат

 

при 80 

о

С в течение 30 мин, опрыскивают 

раствором нингидрина 

0,2% 

и повторно сушат при 100

-105 

о

С в течение 15 мин.

 

Пригодность  системы

:  на  хроматограмме  раствора  сравнения  В 

наблюдаются

 

2 чётко разделённых зоны адсорбции

Основная  зона  адсорбции

 

на  хроматограмме  испытуемого  раствора  Б  по 

положению,  интенсивности  окраски

 

и  величине  должна

 

соответствовать  зоне 

адсорбции

 

на хроматограмме раствора сравнения А.

 

3.  Качественная  реакция.   

50  мг  субстанции  растворяют  в  5  мл  воды, 

прибавляют 1 мл натрия гипохлорита

 

раствора концентрированного и кипятят 2 

мин.  Прибавляют  1  мл  хлористоводородной  кислоты  концентрированной  и 
кипятят  4

-

5  мин.  Прибавляют  2  мл  хлористоводородной  кислоты 

концентрированной  и  1  мл  раствора  резорцина

 

20  г/л,  кипятят  1  мин  и 

3707