Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 3

2. Тонкослойная хроматография

(ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка.

ТСХ пластинка со слоем

силикагеля

254

Подвижная фаза (ПФ

). Бутанол, насыщенный водой

–

толуол

–

эфир

5:10:85.

Смесь растворителей.

Метанол

–

метиленхлорид 1:9.

Испытуемый раствор

. 10

мг субстанции растворяют в 10

мл смеси

растворителей.

Раствор сравнения А.

мг стандартного образца дексаметазона

растворяют в 20 мл смеси растворителей.

Раствор сравнения Б.

мг стандартного образца бетаметазона

растворяют в 10

мл раствора сравнения

А.

На линию старта пластинки наносят по 5

мкл испытуемого раствора,

раствора сравнения

А и раствора сравнения

Б. Пластинку с нанесёнными

пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют
восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт

около 80

– 90 %

длины пластинки

от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления

следов растворителей

и анализируют в УФ

свете при 254

нм.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора

сравнения

Б должны быть видны 2 зоны адсорбции, которые могут быть не

полностью разделены.

Основная зона адсорбции

на хроматограмме испытуемого раствора по

положению и величине должна

соответствовать зоне адсорбции на

хроматограмме раствора сравнения

А.

3. Качественная реакция

. 10,0

мг испытуемой субстанции растворяют в

этаноле и разбавляют тем же растворителем до 100,0

мл. 2,0

мл полученного

раствора помещают в пробирку с пробкой, прибавляют 10,0

мл раствора

фенилгидразина в серной кислоте

концентрированной

перемешивают и

нагревают в водяной бане при 60

С в течение 20

мин. Немедленно охлаждают.

Оптическая плотность при 419

нм должна быть не менее 0,4.