Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

ОФС.1.7.2.0018.15

Определение нуклеиновых кислот по
методу Спирина в биологических
лекарственных препаратах

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для

определения  суммарного  количества  нуклеиновых  кислот  в  биологических
лекарственных  препаратах  (БЛП).  Определение  количества  нуклеиновых
кислот  проводится  спектрофотометрическим  методом  после  проведения
кислотного гидролиза.

Метод основан на измерении разности показателей оптической

плотности  гидролизатов  БЛП  в  ультрафиолетовой  области  спектра,
характеризующей содержание фосфора нуклеиновых кислот.  По результатам
измерения  оптической  плотности  растворов  при  270  нм  (максимум
поглощения  нуклеиновых  кислот)  и  290  нм  (максимум  поглощения
примесей) определяется содержание нуклеиновых кислот.

Спектрофотометрический метод

К 1 мл испытуемого образца прибавляют 5 мл 0,5 М раствора хлорной

кислоты  и  перемешивают.  Смесь  нагревают  на  кипящей  водяной  бане  в
течение 20 мин. После охлаждения гидролизат центрифугируют в течение 20
мин  при  2000  об/мин,  отделяют  осадок  от  надосадочной  жидкости  и
измеряют  оптическую  плотность  надосадочной  жидкости  в  кювете  с
толщиной  слоя  10  мм  при  270  и  290  нм  по  сравнению  с  контрольным
раствором, содержащим 1 мл воды очищенной и 5 мл 0,5 М раствора хлорной
кислоты.

Содержание нуклеиновых кислот (

) в мкг/мл вычисляют по формуле: