Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

ОФС.1.7.2.0019.15

Определение О - ацетильных групп в
полисахаридных вакцинах

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для

определения  О-ацетильных  групп  в  полисахаридных  вакцинах.  Принцип
метода  заключается  в  способности  О-ацетильных  групп  образовывать  с
гидроксиламином  в  щелочной  среде  гидроксамовую  кислоту,  которая  в
кислой среде дает цветную реакцию с ионами железа(III). Определение О -
ацетильных групп проводится колориметрическим методом.

Колориметрический метод

К 1 мл испытуемого раствора прибавляют 2 мл свежеприготовленного

реактива № 1, перемешивают и оставляют на 4 мин при температуре от 18 до
20  °С.  К  полученному  раствору  приливают  1  мл  разведенной
хлористоводородной  кислоты,  перемешивают,  прибавляют  1  мл  0,37  М
раствора железа  (III) хлорида, вновь перемешивают и оставляют на 15 мин
при температуре, указанной выше.

По окончании инкубирования измеряют оптическую плотность

испытуемого и калибровочных растворов при 540 нм в кювете с толщиной
слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором, содержащим 1 мл воды
очищенной и реактивы, указанные выше и добавленные в той же
последовательности.

Содержание О-ацетильных групп (

) в мкмоль/мл вычисляют по

формуле: