Валидация альтернативных микробиологических методов

Количество клеток

микроорганизмов

В первой группе проводится пробоподготовка и испытание образца,

инокулированного целевыми тест-штаммами микроорганизмов (при
необходимости включается шаг нейтрализации антимикробного действия ЛС).
2)

Испытание контрольной группы (положительный контроль) проводится

аналогично, но в отсутствие лекарственного средства. Вместо образца
используется соответствующий растворитель / разбавитель.
3)

Контроль культуры позволяет установить фактическое количество

клеток микроорганизмов в инокуляте, используемом в исследовании. В
большинстве случаев определяется чашечными агаровыми методами.

Аналогичные результаты, полученные для групп 1 и 2, свидетельствуют

об эффективности выбранного способа нейтрализации антимикробного
действия лекарственного средства, между группами 2 и 3 – об отсутствии
токсичности по отношению к определяемому виду микроорганизма.

Валидация альтернативных микробиологических методов

Альтернативные микробиологические методы включают способы

прямого и непрямого определения микроорганизмов в исследуемых образцах
и могут быть условно разделены на несколько групп:

−

методы, основанные на детекции роста, где определению обычно

предшествует стадия культивирования (электрохимические
методы, АТФ-биолюминесценция, измерение потребленного или
образовавшегося газа, микрокалориметрия и др.);

−

методы прямого измерения, подразумевающие дифференциацию и

визуализацию единичных клеток (проточная и твердофазная
цитометрия, методика прямой эпифлуоресцентной микроскопии и
т.д.);

−

методы анализа клеточных структур и их компонентов,

основанные на определении характерных соединений и непрямом
установлении присутствия микроорганизмов (биохимические