background image

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ 

Электрофорез 

ОФС.1.2.1.0023.15 

в полиакриламидном геле 

Вводится впервые 

Настоящая  общая  фармакопейная  статья  распространяется  на  метод 

молекулярной  биологии  и  биохимии  –  электрофорез  в  полиакриламидном 
геле  (ПААГ),  используемый  для  разделения  белков  и  нуклеиновых  кислот, 
который  основан  на  движении  заряженных  биологических  макромолекул  в 
постоянном  электрическом  поле.  Разделение  в  полиакриламидном  геле 
происходит  за  счёт  различий  заряда  разделяемых  молекул  и  отличий 
молекулярных  масс,  а  также  в  зависимости  от  конфигурации  молекул. 
Изменяя  концентрацию  полимера,  можно  получать  гели  с  широким 
диапазоном  размеров  пор,  позволяющих  проводить  разделение  белков  и 
пептидов с молекулярными массами от 2 до 300 кДа. Можно также изменять 
электрический заряд макромолекул (путем вариации рН буферного раствора) 
и  их  конформацию  за  счет  введения  в  буферный  раствор  денатурирующих 
агентов или детергентов. 

Протекание через жидкость электрического тока неизбежно связано с 

выделением тепла, поэтому следует обеспечивать теплоотвод и стабильность 
температурного  режима  с  целью  исключения  изменений  вязкости, 
проводимости  и  скорости  потока  и,  следовательно,  искажения  зон 
анализируемых компонентов. 

Для  наблюдения  за  процессом  в  исходный  препарат  добавляют 

краситель, молекулы которого несут электрический заряд того же знака, что 
и  фракционируемые  молекулы,  но  не  взаимодействуют  с  ними,  причем 

Предыдущая <  | 650  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF