Диапазон размеров разделяемых молекул определяется диапазоном
размеров пор стационарной фазы. Высокомолекулярные вещества, размер
которых превышает максимальный размер пор материала колонки,
мигрируют с большей скоростью между частицами неподвижной фазы, не
задерживаясь и элюируются в свободном объеме колонки (V
0
– объем
колонки за вычетом объема стационарной фазы, соответствует объему
удерживания компонентов, размер молекул которых больше, чем на-
ибольшие поры сорбента). Молекулы с наименьшей молекулярной массой
свободно проходят в поры сорбента вместе с молекулами растворителя,
задерживаясь в них, и элюируются последними. Их объем удерживания
близок к общему объему колонки (V
t,
или общий объём подвижной фазы,
соответствующий объему удерживания компонентов, размер молекул
которых меньше, чем наименьшие поры сорбента). Распределение молекул
по размерам и молекулярной массе происходит в диапазоне между
свободным объемом (V
0
) и общим объемом колонки (V
t,
), представляющим
собой диапазон эксклюзии колонки. Наиболее эффективное распределение
происходит в первые две трети данного диапазона.
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Метод эксклюзионной хроматографии используется в качественном и
количественном анализе лекарственных средств в различных испытаниях,
указанных в ОФС «Высокоэффективной жидкостной хроматографии».
Определение относительного компонентного состава смесей.
Эксклюзионная хроматография применяется для разделения смесей,
компоненты которых достаточно различаются по молекулярной массе,
например, в лекарственных средствах белковой природы.
Разделение проводят по методике, указанной в фармакопейной статье и
нормативной документации. Регистрируют хроматограмму и измеряют
площади соответствующих пиков. Относительное содержание каждого
компонента рассчитывают как отношение площади пика искомого
компонента к сумме площадей пиков всех компонентов смеси. Если для
Предыдущая < | 915 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF