Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Определение основных групп биологически активных веществ

. Тонкослойная хроматография

Раствор стандартного образца (СО)фруктозы

Около 0,1 г фруктозы

растворяют в

100

мл воды

и перемешивают

Срок

годности раствора 1

сут при

хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от

света месте.

Около 0

1г

сырья

измельченного до величины частиц, проходящих

сквозь сито с отверстиями размером1 мм,помещают в колбу со шлифом
вместимостью 50 мл

и прибавляют 10 мл воды. Колбу присоединяют к

обратному холодильнику, нагревают на плитке в течение 1 ч, периодически
встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Затем колбу с содержимым
охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр
(испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со

слоем силикагеля наносят 10 мкл испытуемого раствора

и 5 мкл раствора СО

фруктозы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе

помещают в

камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин смесью
растворителей

бутанол

–

уксусная

кислота

–

эфир

–

вода

(9:6:3:1)

хроматографируют восходящим способом.Когда фронт растворителей
пройдет около 80

–

90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают и

сушат до удаления следов растворителей. Пластинку последовательно
обрабатывают тимоларастворомспиртовым 20

, затем серной

кислотой

разведенной

16 %

и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100

– 1

05 ºС в течение 3 мин.

На хроматограмме СО фруктозы

должна обнаруживаться зона

адсорбции оранжево

красного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны

обнаруживаться не

менее двух

зон

адсорбцииоранжево

красного цвета: зона адсорбциина уровне

зоны адсорбции СОфруктозы

зона адсорбции

ниже

нее

;

допускается

обнаружение других зон адсорбцииоранжево

красного цвета (сахара).