Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) рутина

Около

0,001

г рутина

(рутина тригидрата) растворяют в 10 мл спирта 96 %.Срок годности раствора

не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Раствор СО кверцетина

. 0,001

г кверцетина (кверцетинадигидрата)

растворяют в 10 мл спирта 96 %. Срок годности раствора не более 3 мес при

хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Около 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих

сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, помещают в коническую колбу
со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 10

мл спирта 96 %, нагревают

на водяной бане с обратным холодильником в течение 10 мин. После
охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют
через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля

наносят 20 мкл испытуемого раствора ипо 10 мкл растворов СО рутина и СО
кверцетина. Пластинку с нанесенными пробами сушат

при комнатной

температуре в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно

насыщеннуюне менее 30 мин и

выложенной изнутри фильтровальной

бумагой со смесью растворителей этилацетат

муравьиная кислота безводная

вода (40:4:6) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт

растворителей пройдет около 80

–

90 % длины пластинки от линии старта, ее

вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей.

Затем пластинку нагревают в сушильном шкафу в течение 2

3 мин при

100-

105 ºС и еще теплую обрабатывают последовательно дифенилборной

кислоты аминоэтилового эфира раствором 1% в спирте 96 % и макрогола

400

раствором спиртовым 5

, снова нагревают в сушильном шкафу в течение

мин при 100

105 ºС и просматривают в УФ

свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме растворов СО

рутина и СО кверцетина должны

обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией

желтого или желто