слоем силикагеля наносят
30
мкл испытуемого раствора(см. раздел
«Количественное определение. Сумма флавоноидов»
приготовление
раствора А испытуемого раствора
)
и параллельно в одну полосупо 1 мкл
раствора СО рутина и раствора СО гиперозида.Пластинку с нанесенными
пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру
,
предварительно насыщенную
в течение не менее 60 мин смесью
растворителей этилацетат
–
уксусная кислота ледяная
–
вода (5:1:1), и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей
пройдет около 80
–
90% длины пластинки
от линии старта, ее вынимают из
камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку
выдерживают
при 100
–105
о
С в течение 5
–10
мин и теплую обрабатывают
раствором для детектирования 1, сушат, а затем обрабатывают раствором для
детектирования 2, после полного удаления следов
растворителей пластинку
просматривают в УФ
-
свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме растворов СО рутина иСО гиперозида должна
обнаруживаться зона адсорбции желтого или желто
-
зеленого цвета (рутин) и
над ней зона адсорбции желтого или желто
-
зеленого цвета
(гиперозид).
На хроматограмме испытуемого растворадолжны обнаруживаться (в
порядке возрастания от линии старта) три зоны
адсорбции с флуоресценцией
желтого
или желто
-
зеленого цвета
–
одна из них на уровне зоны
адсорбции
СО
рутина
,
одна из них на уровне зоны
адсорбции СО гиперозида и одна
выше зоны
адсорбции СО гиперозида
,
над этой зоной адсорбции зона
адсорбции зеленого цвета
;
допускается обнаружение других зон
адсорбции
(флавоноиды)
.
2.
Качественные реакции
К 1
мл испытуемого раствора(см. раздел «Количественное
определение. Сумма
флавоноидов»
приготовление раствора А испытуемого
раствора)
прибавляют
1
мл
хлористоводородной
кислоты
концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 2
мин; должно
наблюдаться красное окрашивание
(
лейкоантоцианы
).
Предыдущая < | 6552 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF