Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Тонкослойная хроматография

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем

силикагеля наносят

мкл настойки и 5

мкл раствора СО рутина

(см. раздел

«Количественное определение»

раствор

А СО рутина)

Пластинку с

нанесенными

пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно

насыщенную в течение не менее 1

ч смесью растворителей этилацетат

–

муравьиная кислота

–

вода (80:10:10) и хроматографируют восходящим

способом.

После прохождения фронта растворителей

80 – 90 %

длины

пластинки от линии старта,

пластинку вынимают

и оставляют под тягой до

удаления следов

растворителей

После высушивания пластинку

просматривают в УФ

свете при

длине волны

365

нм

в течение

30-40

мин.

На хроматограмме

раствора СО рутина

обнаруживается зона адсорбции

коричневого

цвета

На хроматограмме настойки должны присутствовать

зона

адсорбции

коричневого цвета на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора СО
рутина, а также зоны голубовато

зеленого, светло

зеленого, голубого,

коричневого, ярко голубого

и красного

цвета

(флавоноиды,

кумарины,

фенолкарбоновые кислоты)

Допускается присутствие дополнительных зон.

2. 3

мл настойки упаривают до 1

мл на водяной бане, разбавляют водой в

соотношении 1:2 и обрабатывают последовательно в делительной воронке 3
раза петролейным эфиром (объемом по 2

мл). Водную (раствор А) и эфирную

(раствор Б

)

фазы

отделяют друг от друга.

мл раствора Б

выпаривают

досуха

и остаток растворяют в

мл спирта

96 %

. К полученному раствору добавляют несколько капель натрия

гидроксида раствора 5

. Раствор приобретает желтый цвет. Затем к раствору

прибавляют несколько капель диазореактива. Раствор приобретает красно

оранжевую окраску (кумарины).

К 2

мл раствора А

и раствора Б

добавляют по

0,5

мл

хлористоводородной кислоты концентрированной и 0,03

-0,05

г цинковой

пыли. При нагревании в растворе А

появляется интенсивное розовое