Чашки Петри выдерживают в эксикаторе, на дно которого наливают 100
мл очищенной воды, при температуре (20
±
2) ºС в течение 48 ч.
Учет реакции проводят при косом освещении на темном фоне. Реакцию
оценивают, как положительную при наличии четко выраженных линий преци-
питации между лунками с иммуноглобулином и сибиреязвенным ЦПА. Макси-
мальное разведение иммуноглобулина, дающее видимую линию преципитации,
считают его титром.
С контрольным образцом
(
нормальной лошадиной сыво-
роткой и сибиреязвенным ЦПА) линии преципитации должны отсутствовать.
2
. Определение превентивных свойств на морских свинках.
Шести морским свинкам массой (275
±
25) г вводят подкожно в область
внутренней поверхности бедра шприцем вместимостью
5,0
мл иммуноглобулин
противосибиреязвенный лошадиный в объеме 2,0 мл. Через (23
±
1) ч
иммунизи-
рованных животных, а также 3 контрольных неиммунизированных морских
свинок, инфицируют подкожно
дозой
50 LD
50
тест
-
штамма
В. аnthracis
71/12
в
1,0 мл. За животными наблюдают в течение 10 суток.
Контрольные животные
должны погибнуть в течение 96 ч.
Для определения величины
LD
50
тест
-
штамма
В. аnthracis
71/12
для мор-
ских свинок берут животных обоего пола массой (275
±
25) г разделяют
на пять
групп, из расчета не менее четырех животных в каждой. Исходя из общей кон-
центрации спор, определяемой по счету в камере Горяева,
культуру тест
-
штамма
В. аnthracis
71/12 разводят стерильным 0,9 % раствором натрия хлори-
да до концентраций 200000, 40000, 8000, 1600, 320 живых спор в 1,0 мл. Жи-
вотным каждой группы под кожу внутренней поверхности правого бедра
шприцем вместимостью 1,0 мл вводят по 0,5 мл соответствующего разведения
тест
-
штамма.
Наблюдение за животными ведут в течение 10 сут. Павших морских сви-
нок вскрывают в асептических условиях и делают мазки
-
отпечатки кусочков
тканей легкого, сердца, печени и селезенки на 2,0
% агар Хоттингера рН 7,2
±
0,1
в чашках Петри. Чашки помещают в термостат при температуре (36
±
1) º
С и вы-
держивают в течение 48 ч.
Предыдущая < | 5807 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF