Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Определение основных групп биологически активных веществ

Приготовление растворов.

Раствор СО рутина.

Около 0,005 г СО рутина (рутина тригидрата) раство-

ряют в 10 мл спирта 96 % и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 ме-

сяцев при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Тонкослойная хроматография

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем

силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 5 мкл (0,005 мл) испытуемого
раствора А (см. раздел «Количественное определение»), рядом - 5 мкл (0,005 мл)
раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат, помещают в каме-
ру со

смесью растворителей

(без предварительного насыщения) этилацетат - му-

равьиная кислота безводная - вода (10:2:3) и хроматографируют восходящим спо-
собом. Когда фронт растворителей пройдет 80

–

90 % длины пластинки от линии

старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и про-
сматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорб-

ции сине-фиолетового цвета.

На хроматограмме раствора А должна обнаруживаться сине-фиолетовая зона

адсорбции на уровне зоны адсорбции СО рутина, одна зона адсорбции сине-
фиолетового цвета ниже зоны адсорбции СО рутина, две зоны адсорбции сине-
фиолетового цвета выше зоны адсорбции СО рутина (флавоноиды).

Затем пластинку обрабатывают алюминия хлорида спиртовым раство-

ром 1 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 –
105 °С в течение 2 – 3 мин и просматривают УФ-свете при длине волны 365
нм.

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорб-

ции с флюоресценцией желто-зеленого цвета.

На хроматограмме раствора А должны обнаруживаться зоны адсорбции с

желто-зеленой флюоресценцией: одна – на уровне зоны адсорбции СО рутина, од-
на – ниже зоны адсорбции СО рутина и две зоны выше зоны адсорбции СО рутина
(флавоноиды).