Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

вместимостью 100

мл, прибавляют 10

мл спирта 96

и нагревают с

обратным холодильником на водяной бане в течение 30

мин.После

охлаждения полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр
(испытуемый раствор).

На линию старта высокоэффективной хроматографической пластинки

со слоем силикагеля наносят 20

мкл испытуемого раствора и 20

мкл раствора

стандартного образца(СО) кумарина (см. раздел «Количественное
определение

раствор А

СО кумарина). Пластинку с нанесенными пробами

сушат при комнатной температуре, помещают в камерупредварительно
насыщенную в течение не менее 30

мин

смесьюрастворителей

уксусная

кислота разведенная

12 % –

эфир

–

толуол (10:50:50)

и хроматографируют

восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80

– 90 %

длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до
удаления следов растворителей

обрабатываюткалия гидроксида 2 М

раствором

спиртовым

и просматривают в УФ

свете при длине волны 365

нм.

На хроматограмме раствора СО кумарина должна обнаруживаться зона

адсорбции с флуоресценцией зеленого, голубовато

зеленого или желтовато

зеленного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться

зоны адсорбции с флуоресценцией: зеленого, голубовато

зеленого или

желтовато

зеленого цвета на уровне зоны адсорбции СО кумарина

;

зона

адсорбции сине

голубого цвета ниже зоны адсорбции СО кумарина, также

возможно обнаружение зоны адсорбции ниже этой зоны с флуоресценцией
зеленого, голубовато

зеленого или желтовато

зеленого цвета; допускается

обнаружение других зон адсорбции

(кумарины)

Высокоэффективная жидкостная хроматография

Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого

раствора,

полученного для количественного определения, должно

соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме
раствора СО кумарина (см. раздел «Количественное определение»).