Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) барбалоина

. Около 0,005

г СО

барбалоина (алоина) растворяют в 10

мл спирта 96 %

и перемешивают. Срок

годности раствора не более 3 мес при хранении в хорошо укупоренной

упаковке

в прохладном защищенном от света месте.

Около 0,5

г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих

сквозь сито с отверстиями размером 0,5

мм,

помещают в колбу со шлифом

вместимостью 100

мл, прибавляют 5

мл спирта

96 %

и нагревают с обратным

холодильником на водяной бане до кипения. После охлаждения полученное
извлечение фильтруют через бумажный фильтр

(испытуемый раствор)

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со

слоем силикагеля наносят

мкл

испытуемого раствора и рядом

мкл

раствора СО барбалоина

Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре

в течение 5

мин, помещают в камеру (выложенную изнутри фильтровальной

бумагой

)

, предварительно насыщенную в течение не менее 60

мин смесью

растворителей этилацетат

–

спирт 96

%–

вода

(100:17:13),

и хроматографируют

восходящим способом

Когда

фронт растворителей пройдет

80–

90 % длины

пластинки

от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат до

удаления следов растворителей

обрабатывают

калия гидроксида раствором 5

% в спирте 50 %

сушат в сушильном шкафу при температуре

100–105

°С в

течение 3

–5

мин и просматривают в УФ

свете при длине волны 365

нм.

На хроматограмме раствора СО барбалоина должна обнаруживаться

зона адсорбции с флуоресценцией коричнево

желтого, зелено

желтого или

желтого цвета

На хроматограмме испытуемого раствора

должны обнаруживаться

зоны адсорбции с флуоресценцией

оранжево

красного или оранжевого

цвета, допускается обнаружение других зон

адсорбции

;

не допускается

обнаружение зоны от желтого до красно

оранжевого цвета на уровне зоны