Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

быть представлены: посевная доза, метод снятия клеток, кратность рассева,
частота пассирования.

Для изучения морфологии клеток применяют также метод электронной

микроскопии, высокая разрешающая способность которого позволяет
выявлять дифференцировку клеток, различать их тончайшие структуры и
наличие многочисленных клеточных органелл.

Определение видовой идентичности

В процессе пассирования клеточных культур возможна видовая и

внутривидовая  контаминация  одних  клеточных  линий  другими.  Разработка
методов  идентификации  клеточных  культур  предполагает  определение  и
изучение  стабильности  клеточных  признаков.  С  этой  целью  разработаны  и
применяются методы электрофореза, кариологического анализа хромосом и
молекулярно-генетические методы (ПЦР).

Основными биохимическими маркерами, специфичными для данного

вида  донора,  позволяющими  определять  внутривидовую  и  видовую
контаминацию  клеточных  культур,  является  анализ  полиморфизма
изоферментов,  обладающих  одинаковой  специфичностью  к  субстрату.
Такими изоферментами являются глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы (Г6ФДГ),
лактат-дегидрогеназы (ЛДГ), нуклеозидфосфорилаза (НФ) и др.

Метод основан на сравнении электрофореграммы изоферментов

исследуемой  линии  клеток  с  электрофореграммой  изоферментов  клеток
известного  вида  донора.  Каждому  виду  соответствует  определенный  набор
изоферментов.  Совпадение  электрофоретической  подвижности  полос  в
опытном  и  контрольном  (стандартном)  образцах  позволяет  заключить,  что
исследуемые клетки принадлежит данному виду.

Изоферменты можно выявить при помощи электрофореза в

полиакриламидном, агарозном гелях или на пленках из ацетата целлюлозы. В
настоящее  время  используют  в  основном  агарозные  и  полиакриламидные
гели.  Различные  изоферменты  мигрируют  с  различной  скоростью  и  по
окончании  электрофореза  могут  быть  выявлены  окрашиванием  с