фиксатора повторяют 2 - 3 раза с промежуточным центрифугированием при
1000 об/мин в течение 5 мин.
Несколько капель суспензии в фиксаторе наносят на влажные и
охлажденные до температуры от 8 до 10 °С предметные стекла и
высушивают в струе теплого воздуха.
Для подсчета модального класса и полиплоидии хромосом клетки
окрашивают 1 % раствором красителя азур-эозина по Романовскому-Гимзе.
Дифференциальное окрашивание С-методом применяют для выявления
структурного гетерохроматина, локализованного в околоцентрических и
центромерных районах хромосом, в коротких плечах акроцентрических
аутосом и в длинном плече Y-хромосомы.
Дифференциальное окрашивание G-методом применяют при
выявлении структурных перестроек и для идентификации маркерных
хромосом. Метод позволяет идентифицировать каждую хромосому.
Дифференциальное окрашивание Q-методом применяют для
идентификации Y-хромосомы и структурных перестроек. Он основан на
окрашивании флюорохромами с двумя производными акрихина – акрихин-
дигидрохлоридом и акрихин-ипритом с исследованием в люминисцентном
микроскопе.
Дифференциальное окрашивание R-методом выявляет различия в
окрашивании гомологичных G- или Q-негативных участков сестринских
хроматид или гомологичных хромосом, что подтверждает специфичность и
стабильность рисунка полос для каждой хромосомы.
Отбор клеток, находящихся в метафазе, для подсчета полиплоидии и
выявления аберраций хромосом, следует проводить по принципу общей
цитологической пригодности.
Частоту полиплоидии (2n, 4n и т.д.) в популяции делящихся клеток
определяют под микроскопом на основании подсчета в метафазных
пластинках.
Предыдущая < | 2844 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF