background image

фиксатора повторяют 2 - 3 раза с промежуточным центрифугированием при 
1000 об/мин в течение 5 мин.  

Несколько  капель  суспензии  в  фиксаторе  наносят  на  влажные  и 

охлажденные  до  температуры  от  8  до  10  °С  предметные  стекла  и 
высушивают в струе теплого воздуха.   

  Для  подсчета  модального  класса  и  полиплоидии  хромосом  клетки 

окрашивают 1 % раствором красителя азур-эозина по Романовскому-Гимзе.  

Дифференциальное окрашивание С-методом применяют для выявления 

структурного  гетерохроматина,  локализованного  в  околоцентрических  и 
центромерных  районах  хромосом,  в  коротких  плечах  акроцентрических 
аутосом и в длинном плече Y-хромосомы. 

Дифференциальное  окрашивание  G-методом  применяют  при 

выявлении  структурных  перестроек  и  для  идентификации  маркерных 
хромосом. Метод позволяет идентифицировать каждую хромосому. 

Дифференциальное  окрашивание  Q-методом  применяют  для  

идентификации  Y-хромосомы  и  структурных  перестроек.  Он  основан  на 
окрашивании  флюорохромами  с  двумя  производными  акрихина  –  акрихин-
дигидрохлоридом  и  акрихин-ипритом  с  исследованием  в  люминисцентном 
микроскопе. 

Дифференциальное  окрашивание  R-методом  выявляет  различия  в 

окрашивании  гомологичных  G-  или  Q-негативных  участков  сестринских 
хроматид или гомологичных хромосом, что подтверждает специфичность и 
стабильность рисунка полос для каждой хромосомы. 

Отбор  клеток,  находящихся  в  метафазе,  для  подсчета  полиплоидии  и 

выявления  аберраций  хромосом,  следует  проводить  по  принципу  общей 
цитологической пригодности. 

Частоту  полиплоидии  (2n,  4n  и  т.д.)  в  популяции  делящихся  клеток 

определяют  под  микроскопом  на  основании  подсчета  в  метафазных 
пластинках.  

Предыдущая <  | 2844  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF