После депарафинирования 100 – 350 препаратов реактивы заменяют.
Методика окрашивания срезов гематоксилин-эозином
. Наиболее часто
применяется окрашивание срезов гематоксилин-эозином. Этим методом
можно
окрашивать
целлоидиновые
срезы,
депарафинированные,
парафиновые или замороженные срезы.
Для окрашивания ядер используется гематоксилин. Наиболее
распространенным является гематоксилин Эрлиха. Для его приготовления
2,0 г гематоксилина растворяют в 100 мл 96° спирта и к полученному
раствору добавляют 100 мл воды очищенной, 100 мл глицерина, 3,0 г
калийных квасцов и 10 мл ледяной уксусной кислоты. Все ингредиенты
нужно добавлять в указанной последовательности. Полученный раствор
необходимо поставить на свету и при доступе воздуха не менее чем на 15
дней с тем, чтобы гематоксилин успел окислиться в гематеин, который и
является красящим веществом. Банку с раствором при этом накрывают
бумажным колпачком или сложенной в несколько раз марлей. Для
доокрашивания цитоплазмы после окраски ядер гематоксилином чаще всего
используется 1 % водный раствор эозина.
Порядок окрашивания срезов гематоксилин-эозином следующий:
1) срезы переносят в дистиллированную воду на 5 – 10 мин;
2) окрашивают гематоксилином Эрлиха 2 – 5 мин;
3) промывают в воде очищенной 1 – 2 с;
4) промывают в водопроводной воде 3 – 5 мин;
5) осуществляют контроль под микроскопом;
6) дифференцируют 1 % раствором хлористоводородной кислоты в 70°
спирте 1 – 2 с;
7) быстро переносят срезы в водопроводную воду на 30 мин при частой
смене воды; в водопроводной воде вишневая окраска ядер сменяется
синей;
Предыдущая < | 2896 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF