раствора, доводят объем раствора водой очищенной до 9,5 мл,
перемешивают, прибавляют 0,5 мл реактива Несслера и вновь
перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого и
калибровочных растворов при длине волны 400 нм в кюветах с толщиной
слоя 20 мм по сравнению с контрольным раствором, приготовленным
аналогичным образом из контрольной пробы.
Содержание белкового азота (Х) в мг/мл вычисляют по формуле:
Х
=
а
·
5
а
5
б
·
1
·
1000
=
а
1000,
где: а – количество азота, рассчитанное по калибровочному графику, мкг;
5
а
– разведение минерализата, мл;
5
б
– объем испытуемого образца, взятый на минерализацию, мл;
1 – объем минерализата, взятый на колориметрирование, мл;
1000 – перевод в миллиграммы.
Построение калибровочного графика.
В химические пробирки вносят
0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6 мл стандартного раствора №3 (содержание белкового
азота 2; 4; 6; 8; 10; 12 мкг соответственно), доводят объем раствора водой
очищенной до 9,5 мл, перемешивают, прибавляют по 0,5 мл реактива
Несслера и вновь перемешивают. В качестве контрольного раствора
используют 9,5 мл воды очищенной и 0,5 мл реактива Несслера. Измеряют
оптическую плотность растворов, как указано выше. Строят калибровочный
график, откладывая по оси абсцисс количество белкового азота (мкг), а по
оси ординат - среднее значение оптической плотности.
Калибровочный график воспроизводят при каждом анализе.
Содержание белкового азота, полученное по методу В, должно
составлять от 2,5 до 10 мкг/мл.
Примечания
Основной стандартный раствор аммония сульфата 0,1 мг/мл (раствор
№1). Приготовление указано в методе А
.
Стандартный раствор аммония сульфата 0,02 мг/мл (раствор №3)
.
В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл раствора №1,
доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают.
Предыдущая < | 2979 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF