Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

микроорганизмов  в  отрицательном  контроле  или  ростовые  свойства
питательной  среды  неудовлетворительны,  а  также  при  отсутствии  роста
микоплазм  в  положительном  контроле  или,  напротив,  при  обнаружении
роста микоплазм в отрицательном контроле. В случае признания испытания
недействительным проводят повторные испытания.

Метод индикаторной клеточной культуры (цитохимический метод)

Обнаружение в клеточных культурах труднокультивируемых на питательных
средах  видов  микоплазм  может  проводиться  цитохимическим  экспресс-
методом,  основанным  на  способности  флюорохромов  связываться  и
окрашивать  ДНК  микоплазм  и  клеток.  Получение  клеточного  монослоя  на
стекле,

фиксирование,

окрашивание

клеток

специфическим

флюоресцирующим  красителем  Hoechst-33258  (Bisbenzimide),  ДАРI  или
аналогичным  и  микроскопирование  в  люминесцентном  микроскопе
позволяют получать результаты исследования немедленно или на 3-5 сутки
испытания.

Метод обнаружения микоплазм с использованием индикаторной

клеточной  культуры  (клеточная  культура  Vero)  основан  на  внесении
испытуемого образца в клеточную культуру, получение клеточного монослоя
на  стекле,  фиксирование,  окрашивание  специфическим  флюоресцирующим
красителем  ДНК  и  микроскопирование  в  люминесцентном  микроскопе.  В
качестве  индикаторной  может  быть  использована  производственная
клеточная  культура  или  другая  клеточная  культура  чувствительная  к
микоплазмам.  Выбранная  индикаторная  клеточная  культура  считается
подходящей,  если  позволяет  обнаруживать  10-100  КОЕ  микроорганизмов
тест-штамма  М.  arginini  G230  или  М.  orale,  M.  hyorhinis,  A.  laidlawii.
Культивирование  индикаторной  клеточной  культуры  проводится  без
использования антибиотиков.