Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

ОФС.1.7.2.0034.15

Определение подлинности
аллергенов

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод

определения подлинности (выявления специфических аллергенных
компонентов) препаратов аллергенов, представляющих собой водно-солевые
экстракты, с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

ОБЩАЯ ЧАСТЬ

Принцип твердофазного иммуноферментного метода анализа изложен

в ОФС «Метод иммуноферментного анализа».

Исследуемый препарат сорбируют в лунках полистиролового

планшета. На аллергосорбент наносят образцы специфических сывороток
крови, содержащие специфические IgE-антитела к данному аллергену. В
результате

образуется

комплекс

антиген-антитело

(АГ-АТ).

образовавшемуся в лунке планшета комплексу (АГ-АТ) добавляют конъюгат

−

моноклональные анти-IgE-антитела, меченные пероксидазой, и индикатор

– тетраметилбензидин (ТМБ) в субстратном буфере. В лунках планшета с
положительной реакцией проявляется цветное окрашивание.

Оптическую плотность растворов в лунках планшета оценивают

фотометрическим методом.

Оценку уровня реакции осуществляют по показателям оптической

плотности четырех разведений референс-сыворотки (1:1; 1:5; 1:25; 1:50,
которые соответствуют 4, 3, 2 и 1 классу специфических IgE-антител.