Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Референс-аллерген – стандартный образец аллергена из пыльцы

амброзии.

Референс-сыворотка – сыворотка крови от пациентов с

амброзийным поллинозом, имеющая уровень специфических IgE-антител,

соответствующий 4 классу.

Положительный контроль

−

аллергенспецифические сыворотки

от пациентов с аллергическими заболеваниями, имеющие уровень

специфических IgE-антител к исследуемому аллергену, соответствующий

−

4 классам.

Отрицательный контроль – сыворотка крови, не содержащая

аллергенспецифических IgE-антител; также используется для разведения

референс-сыворотки.

0,05 М буферный раствор натрия карбоната – буферный раствор

для сорбции.

Система тетраметилбензидин (ТМБ) – субстрат пероксидазы.

Конъюгат – мышиные моноклональные антитела к IgЕ человека,

меченные пероксидазой, концентрированные.

Разводящий и промывающий раствор – фосфатно-солевой

буферный раствор с твином 20 концентрированный (рН 7,1

−

7,3).

10.

Стоп-реагент – 10 % раствор серной кислоты.

11.

Вода очишенная.

ОБОРУДОВАНИЕ

Многоканальный фотометр вертикального сканирования для 96-

луночных планшетов с длиной волны 450 нм.

Термостат (37 ± 1)

С.

Холодильник (8 ± 1)

С.

Автоматические или электронные дозаторы с переменным

объемом (от 50 до 5000 мкл).

Прозрачные разборные 96-луночные планшеты с высокими

сорбционными свойствами.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ

1) 0,01 М буферный раствор натрия карбоната (рН 9,5). Смешивают 2

мл 0,05М раствора натрия карбоната с 8 мл воды очищенной. Полученный

раствор используют на один планшет для ИФА. Хранят при температуре (8 ±

С в течение 1 сут.

2) Раствор тетраметилбензидина (ТМБ). Смешивают 2,5 мл ТМБ

пероксидазы субстрата с 2,5 мл раствора В пероксидазы субстрата

(расходуют на один планшет для ИФА). Раствор готовят за 10 мин до

внесения в планшет (хранению не подлежит).

3) Приготовление рабочих растворов реагентов (растворы №№ 1-2,

растворы референс-сыворотки) – приведено в табл.1.