Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

В – раствор А; в лунки С, D – раствор В; в лунки E, F – раствор С; в лунки G,
H – раствор D.

В ряды 3 и 4 вносят по 50 мкл положительного и отрицательного

контроля: в лунки А

−

F – аллергенспецифическая сыворотка (АС),

содержащая  3  класс  IgE-антител  к  аллергену  полыни,  в  лунки  G,H  –  не
содержащую IgE-антител сыворотку.
     Планшет закрывают крышкой и помещают в термостат при температуре
(37 ± 1) °С на 1 ч.

По истечении времени инкубации жидкость из лунок удаляют в

емкость с дезинфицирующим раствором. В каждую лунку вносят по 200 мкл
раствора № 1 на 2

−

3 мин, после чего жидкость вновь удаляют. Процедуру

отмывки повторяют не менее 3 раз.

В каждую лунку планшета вносят по 100 мкл рабочего раствора №2

(конъюгат) и помещают в термостат при температуре (37 ± 1) °С на 1 ч.
     Отмывку планшета проводят согласно п. 6, повторив процедуру не менее
5 раз.
     Во  все  лунки  планшета  вносят  по  50  мкл  раствора  ТМБ.  Планшет
помещают  в  тёмное  место  и  выдерживают  в  течение  15-20  мин  при
температуре ( 23 ± 2) °С.

Реакцию останавливают добавлением стоп-реагента по 25 мкл во все

лунки и проводят учет результатов. Время между остановкой реакции и
учётом результатов не должно превышать 10 мин.

В лунках, в которых прошла реакция, должно появиться окрашивание

разной степени интенсивности. Лунки первого ряда (контроль конъюгата)
должны оставаться неокрашенными.

Учёт результатов

Учёт результатов проводят фотометрически при длине волны 450 нм.
Вычисляют средние арифметические показателей оптической плотности

(ОП) одноимённых лунок и заполняют по табл. 4.