Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Для подтверждения наличия выраженных отличий в пептидных картах

может быть использована охарактеризованная по составу смесь, включающая
стандартный  образец  изучаемого  пептида  и  пептид,  отличный  от  него  по
структуре.  Использование  охарактеризованных  по  составу  смесей  наиболее
показательны  в  случае,  если  пики  (реперные  пики)  отличных  по  составу
пептидов  элюируются  в  области  худшего  разделения  пиков  на  пептидной
карте

В качестве пептида, отличного по структуре от испытуемого образца

может быть использован пептид принципиально иной структуры, например,
производимый  на  одной  производственной  площадке  и  сходный  по
молекулярной  массе  с  испытуемым  пептидом  или  вариант  испытуемого
пептида,  отличный  от  него  в  определённых  участках  первичной
последовательности (вариабельный пептид) или пептид близкой структуры,
но имеющий выраженные отличия в небелковой части молекулы (например,
пегилированный и непегилированный варианты пептида).

Специфичность методики так же дополнительно оценивается

статистической обработкой соотношений анализируемых параметров пиков и
хроматографического профиля смеси 1:1 (об/об) продуктов гидролиза
испытуемого образца и стандартного образца.

Специфичность методики и идентичность анализируемого образца

пептида  подтверждается,  если  все  пики  продуктов  гидролиза  изучаемого
пептида  и  его  стандартного  образца  имеют  аналогичные  времена
удерживания  и  соотношения  оцениваемых  параметров  пиков.  Если  пики,
которые  изначально  характеризовались  значительно  различающимися
временами удерживания, затем в смеси 1:1 обнаруживались единым пиком,
изначально  выявленное  различие  является  показателем  нестабильности
выбранной  системы  разделения  пептидов.  Однако  если  в  смеси  1:1
наблюдаются  разделенные  пики,  это  является  доказательством  наличия
различных пептидов в каждом из пиков. Если пик в смеси 1:1 существенно