background image

результате, при встрече образуются линии (дуги) преципитации. Положение 
полос  преципитации  зависит  от  коэффициента  диффузии  антигена,  его 
концентрации  относительно  антител  (скорость  диффузии  антитела  можно 
рассматривать  как  постоянную).  Определенное  соотношение  концентраций 
антигена  и  антител,  которое  является  оптимальным  для  образования 
преципитата  называется  зоной  эквивалентности.  В  результате,  при  этих 
условиях образуются четкие линии преципитации.  

Концентрация  (титр)  антител  в  иммунной  сыворотке  также  может 

значительно  варьировать.  Возможна  ситуация,  при  которой  зоны 
эквивалентности  для  разных  компонентов  смеси  не  будут  перекрываться. 
Для 

подбора 

эквивалентного 

соотношения 

антиген-антитело 

иммуноэлектрофорез  многокомпонентных смесей рекомендуется проводить 
при нескольких относительных концентрациях антиген-антитело, так как при 
использовании  только  одной  такой  концентрации  можно  не  обнаружить  те 
или иные компоненты.  

Метод иммуноэлектрофореза в агаровом геле 

Обработанную  спиртом  стеклянную  пластину  размером  90х120  мм 

помешают  строго  горизонтально  на  предметный  столик.  Охлажденный  до 
температуры  (45±5)

0

С  агаровый  гель  наносят  на  стеклянную  пластину  в 

количестве 18,0-20,0 мл. После застывания при комнатной температуре через 
20-30 мин на пластине образуется агаровый слой толщиной 2,0 – 2,5 мм.  

После застывания геля в нем по специальному трафарету вырезают 6-7 

лунок диаметром 1-2 мм. Лунки заполняют испытуемым образцом в объеме, 
не превышающем объем лунки (по 2 лунки на каждый испытуемый образец). 
При этом в верхнюю и нижнюю лунки стеклянной пластинки с гелем вносят 
контрольный  образец  -  нормальную  сыворотку  крови  человека 
(«Стандартный  образец  тест-системы  для  определения  фракционного 
(антигенного)  состава  препаратов  из  сыворотки  крови  человека  методом 
иммуноэлектрофореза»  или  иной  контрольный  образец  в  соответствии  с 
указаниями  в  фармакопейной  статье  или  нормативной  документации), 

Предыдущая <  | 3131  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF