результате, при встрече образуются линии (дуги) преципитации. Положение
полос преципитации зависит от коэффициента диффузии антигена, его
концентрации относительно антител (скорость диффузии антитела можно
рассматривать как постоянную). Определенное соотношение концентраций
антигена и антител, которое является оптимальным для образования
преципитата называется зоной эквивалентности. В результате, при этих
условиях образуются четкие линии преципитации.
Концентрация (титр) антител в иммунной сыворотке также может
значительно варьировать. Возможна ситуация, при которой зоны
эквивалентности для разных компонентов смеси не будут перекрываться.
Для
подбора
эквивалентного
соотношения
антиген-антитело
иммуноэлектрофорез многокомпонентных смесей рекомендуется проводить
при нескольких относительных концентрациях антиген-антитело, так как при
использовании только одной такой концентрации можно не обнаружить те
или иные компоненты.
Метод иммуноэлектрофореза в агаровом геле
Обработанную спиртом стеклянную пластину размером 90х120 мм
помешают строго горизонтально на предметный столик. Охлажденный до
температуры (45±5)
0
С агаровый гель наносят на стеклянную пластину в
количестве 18,0-20,0 мл. После застывания при комнатной температуре через
20-30 мин на пластине образуется агаровый слой толщиной 2,0 – 2,5 мм.
После застывания геля в нем по специальному трафарету вырезают 6-7
лунок диаметром 1-2 мм. Лунки заполняют испытуемым образцом в объеме,
не превышающем объем лунки (по 2 лунки на каждый испытуемый образец).
При этом в верхнюю и нижнюю лунки стеклянной пластинки с гелем вносят
контрольный образец - нормальную сыворотку крови человека
(«Стандартный образец тест-системы для определения фракционного
(антигенного) состава препаратов из сыворотки крови человека методом
иммуноэлектрофореза» или иной контрольный образец в соответствии с
указаниями в фармакопейной статье или нормативной документации),
Предыдущая < | 3131 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF