Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

стандарта. Активность фактора X для каждого разведения испытуемого
образца находят по калибровочному графику. Активность фактора X (

) в

исследуемом образце рассчитывают по формуле:

⋅

где:

−

активность соответствующего разведения исследуемого образца,

найденная по калибровочному графику;

−

разведение исследуемого образца.

Хромогенный метод

Фактор X активируют с помощью полученного из змеиного яда FX-

активатора. Активированный фактор X (FXa) селективно расщепляет
хромогенный субстрат FXa-1 N-α-бензилоксикарбонил-D-аргинил-L-глицил-
L-аргинин-4-нитроанилида

дигидрохлорид,

N-бензоил-L-изолейцил-L-

глутамил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилида гидрохлорид, метансульфонил-
D-лейцил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилид,

метоксикарбонил-D-

циклогексилаланил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилида

ацетат

образованием

-нитроанилина. Образцы исследуют фотометрическим

методом при 405 нм. Количество фактора X пропорционально увеличению
оптической плотности раствора.

Определение фактора X хромогенным методом осуществляют с

помощью  специальных  тестовых  наборов.  Анализ  выполняется  в
соответствии  с  инструкцией  к  набору.  Стандартный  образец  и  препарат
предварительно  разводят  плазмой,  дефицитной  по  фактору  X,  до
концентрации  ~  1  МЕ/мл  (основное  разведение).  Из  основного  разведения
готовят с помощью буферного раствора 3 разведения стандартного образца (в
соответствии  с  инструкцией)  и  3  разведения  препарата.  Каждое  разведение
стандартного  образца  определяют  двухкратно,  полученные  значения
используют для построения  калибровочного графика. Испытуемые образцы
определяют трехкратно.