Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

•

время хроматографирования.

процессе

разделения

фракций

иммуноглобулинов

на

хроматографической  колонке  белковые  молекулы  иммуноглобулина  с
молекулярной  массой  более  40  кДа  свободно  проходят  между  гранулами
носителя  (сорбента),  не  попадая  и  не  задерживаясь  в  пористых  гранулах.
Более  мелкие  молекулы  частично  попадают  и  задерживаются  в  гранулах  и
медленнее вымываются из них подвижной фазой. Очень мелкие молекулы с
молекулярной массой менее 50 кДа попадают в гранулы носителя и медленно
вымываются

подвижной

фазой.

Распределение

по

времени

удерживания/выхода  компонентов  (фракций)  иммуноглобулинов,  о  чем
указывается  в  фармакопейных  статьях  или  нормативной  документации,
происходит  в  порядке  уменьшения  их  молекулярных  масс:  полимеры
(агрегаты),  димеры,  мономеры  Ig  G  (основная  фракция  сывороточного
иммуноглобулина) и фрагменты  Ig G.

Количественный анализ иммуноглобулинов состоит из следующих

стадий: 1) хроматографическое разделение; 2) измерение площади и/или
высоты

пиков;

расчет

количественного

состава

фракций

иммуноглобулинов на основании хроматографических данных; 4)
интерпретация полученных результатов (статистическая обработка данных).

Содержание компонентов (фракций) иммуноглобулинов вычисляется

автоматически  с  помощью  программного  обеспечения  счетно-
аналитического  прибора  по  площадям  пиков  и  указывается  в  процентах.
Процентное  содержание  определяемых  компонентов  иммуноглобулинов
должно  соответствовать  требованиям,  указанным  в  фармакопейной  статье
или нормативной документации.

Пригодность

хроматографической

системы

оценивается

по

стандартным образцам

Хроматографическая система считается пригодной,

если  выполняются  условия,  описанные  в  фармакопейной  статье  или
нормативной  документации:  фактор  разрешения  (R)  между  пиками,
эффективность  хроматографической  колонки,  рассчитанная  по  пику  с