антиальфастафилолизина в 1,0 мл и добавляют по 1,0 мл приготовленных
разведений токсина в каждую пробирку с СО. В контрольную пробирку
(контроль отсутствия спонтанного лизиса эритроцитов кролика) вносят 2,0 мл
0,9% раствора натрия хлорида. Пробирки со смесью антигена
(стафилотоксина) с антителом (СО антиальфастафилолизина) осторожно
встряхивают и инкубируют при температуре от 18 до 22°С в течение 15 мин.
Затем в каждую пробирку ряда (опытные и контрольную) добавляют по 0,1 мл
свежеприготовленной 15% взвеси эритроцитов с установленной величиной
оптической плотности. Пробирки снова осторожно встряхивают и инкубируют
в термостате при температуре (37,0±0,5)°С в течение 1 ч.
Результаты учитывают визуально по степени гемолиза:
(++++)
– полный гемолиз эритроцитов;
(+++)
– почти полный гемолиз эритроцитов;
(++)
– частичный гемолиз (50%-ный гемолиз эритроцитов);
(+) – следы гемолиза эритроцитов;
( - )
– отсутствие гемолиза эритроцитов.
В контрольной пробирке гемолиз эритроцитов должен отсутствовать.
Количество токсина, содержащееся в первой пробирке, в которой
произошел почти полный гемолиз (+++) эритроцитов, принимается за лимит
его гемолитического действия в условиях опыта.
Методика определения содержания антиальфастафилолизина в
испытуемых образцах в концентрации 0,2 МЕ/мл и выше
Стафилококковый
токсин
с
установленной
величиной
Lh
непосредственно перед проведением анализа разводят 0,9% раствором натрия
хлорида до содержания Lh/5 в 1,0 мл (рабочий раствор токсина). Количество
исходного токсина и объем рабочего раствора стафилококкового токсина,
необходимый для проведения анализа, рассчитывают, исходя из
установленной величины Lh токсина и количества пробирок, необходимых
для проведения анализа.
Для определения концентрации антиальфастафилолизина в 1 мл
Предыдущая < | 3187 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF