background image

антиальфастафилолизина  в  1,0  мл  и  добавляют  по  1,0  мл  приготовленных 
разведений  токсина  в  каждую  пробирку  с  СО.  В  контрольную  пробирку 
(контроль отсутствия спонтанного лизиса эритроцитов кролика) вносят 2,0 мл 
0,9%  раствора  натрия  хлорида.  Пробирки  со  смесью  антигена 
(стафилотоксина)  с  антителом  (СО  антиальфастафилолизина)  осторожно 
встряхивают и инкубируют при температуре от 18 до 22°С в течение 15 мин. 
Затем в каждую пробирку ряда (опытные и контрольную) добавляют по 0,1 мл 
свежеприготовленной  15%  взвеси  эритроцитов  с  установленной  величиной 
оптической плотности. Пробирки снова осторожно встряхивают и инкубируют 
в термостате при температуре (37,0±0,5)°С в течение 1 ч.  
Результаты учитывают визуально по степени гемолиза: 

(++++) 

 

– полный гемолиз эритроцитов; 

(+++) 

 

– почти полный гемолиз эритроцитов; 

(++) 

 

– частичный гемолиз (50%-ный гемолиз эритроцитов); 

(+) – следы гемолиза эритроцитов; 
( - ) 

 

– отсутствие гемолиза эритроцитов.  

В контрольной пробирке гемолиз эритроцитов должен  отсутствовать.  

Количество  токсина,  содержащееся  в  первой  пробирке,  в  которой 

произошел почти полный гемолиз (+++) эритроцитов, принимается за лимит 
его гемолитического действия в условиях опыта.  

Методика  определения  содержания  антиальфастафилолизина  в 

испытуемых образцах в концентрации 0,2 МЕ/мл и выше 

Стафилококковый 

токсин 

с 

установленной 

величиной 

Lh 

непосредственно перед проведением анализа разводят 0,9% раствором натрия 
хлорида до содержания Lh/5 в 1,0 мл (рабочий раствор токсина). Количество 
исходного  токсина  и  объем  рабочего  раствора  стафилококкового  токсина, 
необходимый  для  проведения  анализа,  рассчитывают,  исходя  из 
установленной  величины  Lh  токсина  и  количества  пробирок,  необходимых 
для проведения анализа.  

Для  определения  концентрации  антиальфастафилолизина  в  1  мл 

Предыдущая <  | 3187  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF