Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

остановки гемолиза отобранные пробирки помещают в холодильник на 10
минут при температуре 2-8

С. После охлаждения пробирки центрифугируют в

течение 5 мин при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость из каждой пробирки
быстро  и  осторожно  отбирают  в  чистые  сухие  пробирки  и  определяют
оптическую  плотность  при  длине  волны  400  нм,  используя  кюветы  с
толщиной  слоя  1  мм.  Раствором  сравнения  служит  0,9%  раствор  натрия
хлорида. Оптическая плотность, соответствующая 50% гемолизу эритроцитов,
должна быть равна 0,35±0,05.

Аналогичным образом определяют оптическую плотность надосадочной

жидкости  в  пробирках  контрольного  ряда,  содержащих  разведения  СО
антиальфастафилолизина.  При  оптимальных  условиях  опыта  50%  гемолиз
эритроцитов  и  величина  оптической  плотности,  равная  0,35±0,05,
регистрируются

пробирке,

содержащей

0,1

МЕ

СО

антиальфастафилолизина,  т.е.  расчетная  доза  Lh/10  точно  соответствует  её
истинному  значению.  В  этом  случае  пробирка  опытного  ряда,  в  которой
зарегистрирован  гемолиз  50%  эритроцитов,  содержит  0,1  МЕ
антиальфастафилолизина в объеме 0,5 мл, что соответствует содержанию 0,2
МЕ  в  мл.  Для  расчета  содержания  антиальфастафилолизина  в  1,0  мл
неразведенного  исследуемого  образца,  необходимо  0,2  МЕ  умножить  на
величину  разведения  в  данной  пробирке.  Например,  первая  пробирка,  в
которой  надосадочная  жидкость  имеет  величину  оптической  плотности
0,35±0,05,  содержит  препарат  в  разведении  1:100;  следовательно,  1  мл
неразведенного препарата содержит 0,2 МЕ∙100=20 МЕ.

В результате влияния различных факторов возможно несоответствие

дозы  токсина,  используемой  в  опыте,  получаемому  расчетному  значению.  В
таких случаях при расчете специфической активности испытуемых препаратов
применяется  коэффициент  пересчета  (К),  определяемый  для  каждого
конкретного анализа по формуле:

К = а/0,1,

где: а – концентрация (количество МЕ) СО антиальфастафилолизина в