клетки (живые клетки не окрашиваются, мертвые или поврежденные клетки
окрашиваются). Наиболее часто используемые красители – трипановый
синий, эритрозин В или нигрозин. Оптимальное значение рН 7,5.
Концентрация красителя и время окрашивания валидируются.
Окрашивание клеточной суспензии, например раствором трипанового
синего проводят, осторожно смешивая краситель с суспензией микробных
клеток. Выдерживают в течение 2 мин. при комнатной температуре. Далее
перемешивают и помещают в счетную камеру. Подсчет проводят
незамедлительно. Необходимо, чтобы время контакта клеток с красителем
при окрашивании составляло не более 4 мин., так как увеличение времени
экспозиции с красителем значительно увеличивает количество окрашенных
клеток.
Процентное содержание жизнеспособных клеток (
Х
) определяют как
отношение числа неокрашенных (живых) клеток к общему числу клеток под
оптическим микроскопом. При этом учитывают как все неокрашенные
(живые), так и все окрашенные (мертвые) клетки. Жизнеспособность (Х) а
процентах (%) определяется по формуле:
X =
n
N
∙
100
;
где: n
−
число неокрашенных жизнеспособных клеток,
N
−
общее число клеток.
Предыдущая < | 2799 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF