background image

клетки (живые клетки не окрашиваются, мертвые или поврежденные клетки 
окрашиваются).  Наиболее  часто  используемые  красители  –  трипановый 
синий,  эритрозин  В  или  нигрозин.  Оптимальное  значение  рН  7,5. 
Концентрация красителя и время окрашивания валидируются.  

Окрашивание  клеточной  суспензии,  например  раствором  трипанового 

синего  проводят,  осторожно  смешивая  краситель  с  суспензией  микробных 
клеток.  Выдерживают  в  течение  2  мин.  при  комнатной  температуре.  Далее 
перемешивают  и  помещают  в  счетную  камеру.  Подсчет  проводят 
незамедлительно.  Необходимо,  чтобы  время  контакта  клеток  с  красителем 
при  окрашивании  составляло  не  более  4  мин.,  так  как  увеличение  времени 
экспозиции  с  красителем  значительно  увеличивает  количество  окрашенных 
клеток.  

Процентное  содержание  жизнеспособных  клеток  (

Х

)  определяют  как 

отношение числа неокрашенных (живых) клеток к общему числу клеток под 
оптическим  микроскопом.  При  этом  учитывают  как  все  неокрашенные 
(живые),  так  и  все  окрашенные  (мертвые)  клетки.  Жизнеспособность  (Х)  а 
процентах (%) определяется по формуле: 

X =

n

N

100

 

где:  n 

 число неокрашенных жизнеспособных клеток, 

 общее число клеток. 

 

Предыдущая <  | 2799  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF