Соответствующее
количество
пара
-диметиламинобензальдегида
растворяют в изоамиловом или амиловом спирте при нагревании на водяной
бане при температуре (52,5 ± 2,5)
о
С, остужают и по каплям прибавляют
хлористоводородную кислоту. Раствор хранят в защищенном от света месте
при температуре 2 – 8
о
С. Реактив должен быть желтого цвета. При
неправильном хранении цвет реактива становится коричневым, и реактив
становится непригодным для использования.
В пробирку с соево-казеиновым бульоном, в которой выросла
исследуемая суточная культура, вносят 0,5 мл реактива Ковача и слегка
встряхивают. Через 3 – 5 мин при наличии индола наблюдают появление
красного кольца на поверхности среды в пробирке. Положительным
контролем является тест-микроорганизм
E. coli
, отрицательным – тест-штамм
S. enterica ssp.enterica ser.abony
(окраска отсутствует).
8.3. Тест на наличие фермента коагулазы (реакция плазмокоагуляции)
Сухую цитратную кроличью плазму разводят согласно приложенной
инструкции 0,9 % стерильным раствором натрия хлорида и разливают по 0,5
мл в стерильные пробирки. Вносят в пробирку с восстановленной кроличьей
плазмой 1 петлю суточной чистой культуры выделенных бактерий,
выращенных на соево-казеиновом агаре (или на среде № 1). Вторую
пробирку не инокулируют (отрицательный контроль). Положительным
контролем служит тест-штамм
S. aureus
, отрицательным – тест-штамм
S. epidermidis
. Все пробирки инкубируют в стандартных условиях. Реакцию
плазмокоагуляции отмечают через каждый час в течение 4 – 6 ч, слегка
наклоняя пробирку, не встряхивая ее.
При отсутствии положительной реакции плазмокоагуляции удлиняют
время инкубации до 24 ч для получения окончательных результатов. Тест на
наличие коагулазы считается положительным при обнаружении сгустка
плазмы.
Предыдущая < | 1167 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF