Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

Рабочее разведение испытуемого препарата готовят исходя из того, что

соотношение количества МЕ ЛГ к МЕ ФСГ в урофоллитропине должно быть не
более чем 1:60. Концентрация ФСГ в рабочем разведении испытуемого
препарата должна быть равной 60Х, где Х – количество МЕ ЛГ в рабочем
разведении СО средней концентрации.

Первой группе крыс вводят рабочее разведение испытуемого препарата в

объёме 0,5 мл на животное, а второй, третьей и четвёртой группе − рабочие
разведения СО в малой, средней и большой концентрации соответственно в том
же объёме.

Точно через 4 ч после введения рабочих растворов испытуемого

препарата и СО крыс подвергают эвтаназии. Вскрывают брюшную полость,
извлекают яичники, освобождают от жировой и соединительной ткани и
немедленно взвешивают.

Далее яичники от каждой крысы гомогенизируют отдельно в течение

2 мин в свежеприготовленном 2,5 % растворе метафосфорной кислоты
(Примечание 3) при температуре 4° С и доводят объём до 7,0 мл

тем же

раствором.  Гомогенат  отстаивают  30  минут  при  той  же  температуре,  затем  в
течение  5  мин  центрифугируют  (2500  g;  4 °С).  При  необходимости
надосадочную жидкость пропускают через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм.

Концентрацию аскорбиновой кислоты в пробах определяют

спектрофотометрическим  методом.  Для  этого  непосредственно  перед
измерением  оптической  плотности  для  каждой  пробы  готовят  раствор,
смешивая 2 мл раствора натрия ацетата рН 7,0 (Примечание 4), 3 мл воды для
инъекций  и  2  мл  раствора  2,6-дихлорфенолиндофенолята  натрия
(Примечание  5).  Затем  2  мл  полученного  раствора  добавляют  к  2  мл
надосадочной жидкости, перемешивают и через 30 мин измеряют оптическую
плотность при длине волны 520 нм.

Для оценки полученных результатов строят стандартную кривую. В

качестве стандарта используют раствор аскорбиновой кислоты. Для этого