которых микроорганизмы успешно выделяются, фиксируют и сравнивают с
ожидаемым значением, полученным на основании статистической модели.
Для этих целей используют биномиальное распределение, распределение
Пуассона или др.
Пример:
Готовят последовательные разведения суспензии микроорганизмов до
получения взвеси с минимальной концентрацией клеток, которую возможно
обнаружить, после чего определенным объемом каждого разведения культуры
инокулируют не менее 5 пробирок с жидкой питательной средой.
Одновременно определяют фактическое количество внесенных клеток
микроорганизма чашечным агаровым методом. После инкубации определяют,
сколько пробирок каждого разведения дают положительный результат. Если
предположить, что каждая жизнеспособная клетка в состоянии вызвать
помутнение среды, то, исходя из распределения Пуассона, относительное
число S пробирок, оставшихся прозрачными после внесения в пробирку m
клеток, равно относительному числу пробирок, в которые не попало ни одной
КОЕ. В этом случае
.
При этом относительное число пробирок (P), ставших мутными, равно
или
. Так, если в образце содержится 1 КОЕ, то
теоретически, рост должен быть обнаружен в 63% случаев.
3. Математический расчет
В некоторых случаях 50% предел обнаружения может быть определен
математически, для чего используют обобщенную формулу Спирмена-
Кербера (формула 1).
где: µ – математическое ожидание среднего количества клеток – 50% предел
обнаружения;
x
i
– log концентраций вносимых клеток (x
i
<… < x
k
);
k – количество концентрационных уровней;
Предыдущая < | 431 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF