В некоторых случаях необходимо уменьшить или изменить
направление электроосмотического потока. Для этого различным образом
модифицируют внутреннюю стенку капилляра или изменяют рН буферного
раствора.
После введения образца в капилляр каждый анализируемый ион
движется внутри фонового электролита в виде отдельной зоны в
соответствии со своей электрофоретической подвижностью. Степень
размывания каждой зоны растворенного соединения определяется
совокупностью различных причин. В идеальном случае единственной
причиной размывания зон является продольная молекулярная диффузия
растворенного вещества вдоль капилляра. В этом, идеальном, случае
эффективность разделения полосы, характеризуемая числом теоретических
тарелок (
N
), выражается формулой:
𝑁
=
(
μ
эф
+
μ
эо
)
∙ 𝑉
∙ 𝑙
2
∙ 𝐷
∙ 𝐿
, (7)
где
D
– молекулярный коэффициент диффузии растворенного вещества
в буферном растворе.
На практике на размывание полос значительное влияние оказывают
тепловое рассеяние, адсорбция образца на стенке капилляра, различная
проводимость между образцом и буфером, длительность ввода пробы,
размеры детектирующей ячейки и различия уровней жидкости в емкостях с
буферными растворами.
Разделение между двумя полосами, называемое разрешением (
R
s
),
определяют по формуле (8):
𝑅
𝑆
=
√𝑁
∙
(
μ
эфб
−
μ
эфа
)
4
∙
(
μ�
эф
+
μ
эо
) , (8)
где μ
эфб
и μ
эфа
– электрофоретические подвижности каждого из двух
разделенных ионов;
μ�
эф
– их средняя электрофоретическая подвижность.
Среднюю электрофоретическую подвижность определяют по формуле:
Предыдущая < | 636 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF