вещества наиболее часто используется додецилсульфат натрия, в качестве
катионного – соли цетилтриметиламмония.
При нейтральных и щелочных значениях рН возникает сильный
электроосмотический поток, который движет ионы разделяющего буфера в
сторону катода. При использовании в качестве поверхностно-активного
вещества додецилсульфата натрия электрофоретическое движение анионных
мицелл направлено в противоположную сторону – к аноду. В результате
суммарная скорость движения мицелл снижена по сравнению с основным
потоком раствора электролита. В случае нейтральных веществ скорость
движения компонента, не имеющего электрофоретической подвижности,
зависит только от его коэффициента распределения между мицеллой и
водной средой. На электрофореграмме сначала появляется пик маркера
электроосмотического потока, затем пики аналитов, и в конце – пик маркера
мицелл. Время между первым и последним пиком называется окном
разделения. На движение заряженных веществ влияют как их коэффициенты
распределения между мицеллой и водным буферным раствором, так и их
собственная электрофоретическая подвижность.
Движение аналитов и разрешение может быть описано термином
«фактор удерживания (
k
)», представляющим собой отношение молярных
долей аналита в мицелле и в подвижной фазе. Для нейтрального вещества
k
вычисляют по формуле:
R
0
S
M
R
0
mc
1
−
=
=
−
t
t
V
k
K
V
t
t
t
,
(10)
где
t
R
– время миграции аналита;
t
0
– время миграции неудерживаемого вещества;
t
mc
– время миграции мицеллы;
K
– коэффициент распределения аналита;
V
S
– объем мицеллярной фазы;
V
M
– объем подвижной фазы.
Разрешение для двух близко движущихся аналитов (
R
S
) рассчитывают
по формуле:
Предыдущая < | 641 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF