background image

После  обесцвечивания  гель  промывают  водой  и  либо  высушивают, 

либо оставляют в воде для хранения при температуре от 2 до 8 °С. 

Окраска раствором нитрата серебра 

Погружают  гель  в  большой  избыток  фиксирующего  раствора  и 

выдерживают  в  течение  1  ч.  Фиксирующий  раствор  сливают,  добавляют 
новую  порцию  того  же  раствора  и  инкубируют,  по  крайней  мере  1  ч  или 
оставляют  на  ночь.  Сливают  фиксирующий  раствор  и  промывают  гель  в 
большом  избытке  воды  в  течение  1  ч.  После  этого  пропитывают  гель  в 
течение  15  мин  в  1  %  растворе  глутарового  альдегида.  Промывают  гель 
дважды по 15 мин большим количеством воды. Выдерживают гель в темноте 
в  свежеприготовленном  2  %  растворе  серебра  нитрата  в  течение  15  мин. 
Промывают гель три раза по 5 мин в большом количестве воды. Погружают 
гель  приблизительно  на  1  мин  в  проявляющий  раствор,  пока  не  будет 
достигнуто  удовлетворительное  окрашивание.  Окрашивание  прекращают  в 
момент проявления полосы в треке с минимальным количеством препарата 
(например, 0,001 мкг). Останавливают развитие окраски погружением в стоп-
раствор на 15 мин. Ополаскивают гель водой.  

Целесообразно  использовать  готовые  наборы  реактивов  для 

окрашивания гелей серебра нитратом. 

Высушивание проявленных SDS-полиакриламидных гелей 

В зависимости от используемого метода окрашивания подготовку геля 

к высушиванию проводят различными способами: 

–  при  окраске  Кумасси  после  процедуры  обесцвечивания  гель 

выдерживают в смеси 10,0 г глицерина и 92 мл воды очищенной не менее 2 ч 
(возможна инкубация «на ночь»); 

– при окраске нитратом серебра гель после заключительной процедуры 

ополаскивания выдерживают в течение 5 мин в смеси 2,0 г глицерина и 98 мл 
воды очищенной. 

Погружают  два  листа  пористой  целлюлозной  пленки  в  воду  и 

выдерживают в течение 5–10 мин. Растягивают один из листов на рамке для 

Предыдущая <  | 664  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF