Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

МЕТОД 9. Использование масс-спектрометрического детектирования
для

определения

производных

аминокислот,

полученных

предколоночной дериватизацией.

Масс-спектрометрическое детектирование в режимах мониторинга по

выделенным ионам (MS) или мониторинга множественных реакций (MS/MS)
с электрораспылительной или химической ионизацией при атмосферном
давлении позволяет проводить высокочувствительное и селективное
определение

производных

аминокислот

после

предколоночной

дериватизации  с  различными  реагентами,  описанными  выше.  Разделение
производных  аминокислот  обычно  осуществляется  методом  обращенно-
фазовой  ВЭЖХ  в  режиме  градиентного  элюирования  при  использовании
элюентов на основе легколетучих компонентов (органические кислоты и их
аммонийные  соли,  гидрокарбонат  аммония,  аммиак  и  алкиламины  и  пр.).
Высокая селективность масс-спектрометрического детектирования позволяет
выполнять  экспрессный  анализ  сложных  смесей  аминокислот  без
необходимости  достижения  полноты  разделения  критичных  пар  и  групп
пиков. Пределы обнаружения производных аминокислот обычно составляют
несколько нг/мл.

Использование масс-спектрометрического детектирования для

определения

нативных

аминокислот

также

возможно,

однако

характеризуется значительно меньшей чувствительностью.

МЕТОД 10. Определение нативных аминокислот с импульсным
амперометрическим детектированием

Аминокислоты в белковом/пептидном гидролизате разделяются

ионохроматографически на колонке, заполненной гидрофобной полимерной
анионообменной  смолой  с  тетраалкиламмониевыми  функциональными
группами.  Разделение  проводят  в  градиентном  режиме  путем  изменения
концентрации гидроксид- и ацетат-ионов в водном элюенте. Детектирование
аминокислот  в  элюате  осуществляется  при  помощи  импульсного