веществ время затухания флуоресценции составляет обычно 10
-9
−
10
-8
с.
Короткое время жизни флуоресценции отличает этот тип люминесценции от
фосфоресценции, которая представляет собой долгоживущее свечение,
имеющее время жизни от 10
-3
с до нескольких мин.
Метод флуориметрии в 10
−
100 раз чувствительнее абсорбционной
спектрофотометрии, но флуоресцентными свойствами обладает только
ограниченный
круг
соединений:
ароматические,
особенно
с
конденсированными структурами, гетероциклические и карбонильные
соединения. Из фармацевтических субстанций определению методом
флуориметрии подлежат аминокислоты (фенилаланин, триптофан, тирозин),
алкалоиды (стрихнин, резерпин, хинин), витамины (фолиевая кислота,
рибофлавин, ретинола ацетат), стероидные гормоны (этинилэстрадиол).
Интенсивность флуоресценции измеряется в условных единицах,
пропорциональных отклику детектора и обозначается символом
I
.
Спектр испускания флуоресценции
представляет собой зависимость
интенсивности флуоресценции от длины волны (в нм) или частоты (в см
-1
) при
заданной длине волны возбуждения.
Спект р возбуж дения флуоресценции
представляет собой зависимость интенсивности излучения в максимуме
испускания флуорофора от длины волны или частоты возбуждающего света.
При этом спектр возбуждения обычно совпадает со спектром поглощения, так
же как и интенсивность флуоресценции пропорциональна светопоглощению.
Комбинирование спектров испускания, полученных при различных длинах волн
возбуждения, даёт трёхмерную карту испускания.
Приборы. Для проведения флуориметрического анализа используют
приборы двух типов:
фильт рационный флуоримет р
и
спект рофлуоримет р
.
Фильт рационный флуоримет р
состоит из источника излучения,
первичного фильтра длин волн, камеры для образца, вторичного фильтра длин
волн и системы детектирования флуоресценции. Как правило, детектор
Предыдущая < | 778 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF