Полученные в ходе эксперимента спектры кругового дихроизма сравнивают
со стандартными спектрами КД. Благодаря этому получают качественный и
количественный состав исследуемого образца. Метод КД обладает высокой
чувствительностью (вплоть до анализа десятков микрограммов субстанции).
Методика
Из образцов готовят растворы одинаковой концентрации.
Концентрацию подбирают таким образом, чтобы при максимуме поглощения
исследуемого вещества оптическая плотность составляла примерно 1.
Растворы помещают в кварцевую кювету и проводят измерение КД на
соответствующем приборе в указанном диапазон длин волн. Далее проводят
анализ полученных спектров, сравнивая их с реперными спектрами и
проверяя наличие эффекта Коттона в области поглощения хромофора.
Наличие или отсутствие данного эффекта может определить обладает ли
образец оптической активностью.
Непосредственное измерение оптической плотности дает следующее
выражение:
𝜟𝜟𝐴
=
𝐴₁ − 𝐴₂
,
где
𝜟𝜟
A
– оптическая плотность кругового дихроизма;
A
1
– оптическая плотность для света с левой круговой поляризацией;
A
2
– оптическая плотность для света с правой круговой поляризацией.
Величину кругового дихроизма рассчитывают по следующей формуле:
𝜟𝜟𝜀
=
𝜀₁ − 𝜀₂
=
𝜟𝜟𝐴
с
×
𝑙
,
где
𝜟𝜟𝛆𝛆
– молярный круговой дихроизм или молярный
дифференциальный дихроичный коээфициент поглощения, л·моль·см
-1
;
𝛆𝛆₁
- молярный коэффициент поглощения для света с левой круговой
поляризацией;
𝛆𝛆₂
- молярный коэффициент поглощения для света с правой круговой
поляризацией;
с – концентрация вещества в исследуемом растворе, моль·л
-1
;
l – длина оптического пути, см.
Предыдущая < | 841 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF