Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

Эксклюзионная высокоэффективная жидкостная хроматография

Эксклюзионная хроматография (гель-хроматография) – особый вариант

высокоэффективной жидкостной хроматографии, основанный на разделении
молекул по их размерам. Распределение молекул между неподвижной и
подвижной фазами основано на размерах молекул и частично на их форме и
полярности.

Возможны два предельных типа взаимодействия молекул с пористой

неподвижной фазой. Молекулы с размерами, превышающими максимальный
диаметр пор, вообще не удерживаются и элюируются первыми, перемещаясь
одновременно  с  подвижной  фазой.  Молекулы  с  размерами,  меньшими  чем
минимальный  диаметр  пор  сорбента,  свободно  проникают  в  поры  и
элюируются  из  колонки  последними.  Остальные  молекулы,  имеющие
промежуточные  размеры,  удерживаются  в  порах  частично  и  в  ходе
элюирования разделяются на фракции в соответствии со своими размерами
и, частично, формой проникают в поры сорбента в зависимости от размера и
частично в зависимости от своей формы. В результате вещества элюируются
с различными временами удерживания.

Ионоэксклюзионная хроматография

В основе механима ионоэксклюзионной хроматографии лежит эффект,

в результате которого соединения в ионизированной форме не удерживаются
на  сорбенте-ионообменнике,  тогда  как  соединения  в  молекулярной  форме
распределяются  между  неподвижной  и  водной  фазами  внутри  пор
ионообменного  сорбента  и  подвижной  фазой  мигрирующее  в  пространстве
между  частицами  сорбента.  Разделение  основано  на  электростатическом
отталкивании,  полярных  и  гидрофобных  взаимодействиях  между
растворенными соединениями и сорбентом.

Анионогенные группы на поверхности сорбента действуют как

полупроницаемая  «мембрана»  между  стационарной  и  подвижной  фазами.
Отрицательно  заряженные  компоненты  не  достигают  стационарной
подвижной  фазы,  так  как  отталкиваются  одноименно  заряженными