background image

цины  желтой  лихорадки,  откалиброванного  по  Международному  стандарту 
вакцины желтой лихорадки.

 

Одну ампулу стандартного образца титруют три 

раза для  подтверждения достоверности  каждого  количественного определе-
ния активности. 

 

Определение  специфической  активности  вакцины  (титр  в  БОЕ).

 

Определение специфической активности (титр в 

БОЕ

) вакцины проводят пу-

тем  титрования

 

вируса

 

методом  бляшек  в  культурах  клеток  ФЭК, 

PS 

или

 

Vero

Готовят  последовательные  разведения    вакцины

: 1:10; 1:100; 1:000; 

1:10000 в 0,9

 

% растворе натрия хлорида с 2

  % 

раствором

 

сыворотки крови 

плодов коровы, жидкой, инактивированной при температуре 

56 +1 

0

С в тече-

ние 30 мин

 

(для исключения возможности присутствия ингибиторов вируса 

желтой лихорадки)

Каждое разведение в объёме 0,1 мл вносят в три флакона 

вместимостью

 

100,0 мл с полностью сформировавшимся монослоем клеток 

ФЭК

 

или  в  три  лунки  6

-

ти  или  12

-

ти  луночных  планшетов  с

 

полностью 

сформировавшимся монослоем культур клеток 

Vero

 

или

 PS. 

Инфицированные клетки

 

во флаконах  или планшетах помещают на 2

 

ч 

в  термостат  при  температуре 

37  +1 

0

С.  Через  каждые  15

20  мин  проводят 

«

обкатывание

» 

монослоя  клеток  вируссодержащей  жидкостью  путем  пока-

чивания флаконов или планшетов. По истечении

 

периода адсорбции вируса в 

каждый флакон 

(

или лунку планшета

наносят

 

агаровое покрытие и инкуби-

руют (раздел «Подлинность

»). 

Учёт результатов. 

Определение титра вируса желтой лихорадки

 

про-

водят  на 5 сут при титровании в культурах клеток ФЭК или 

PS

, и на 6 

-

7 сут 

при титровании  в культуре клеток 

Vero

Подсчитывают  количество бляшек  отдельно в каждом флаконе 

(

лун-

ке

)

, после чего определяют среднее количество бляшек для каждого разведе-

ния вируса и определяют концентрацию  вируса в одной прививочной дозе 

5433