background image

в  5

 

мл  свежеприготовленной  смеси  серная  кислота  концентрированная 

– 

метанол  3:97.  Содержимое  колбы  кипятят  с  обратным  холодильником  в 
течение  1

 

ч,  охлаждают,  промывают  холодильник  10

 

мл  метанола,  собирая 

смывы  в  колбу  с  раствором,  и  доводят  объем

 

полученного  раствора 

метанолом до 20

 

мл.

 

Стандартный  раствор

.  Около  36

 

мг  (точная  навеска) 

D

-

маннозы 

помещают  в  колбу  для  перегонки  вместимостью  50

 

мл,  растворяют  при 

энергичном  перемешивании  в  5

 

мл  свежеприготовленной  смеси  серная 

кислота  концентрированная 

– 

метанол    3:97.  Содержимое  колбы  кипятят  с 

обратным  холодильником  в  течение  1

 

ч,  охлаждают,  промывают 

холодильник 10

 

мл метанола, переносят количественно полученный

 

раствор 

в мерную колбу вместимостью 50

 

мл и доводят объем раствора метанолом до 

метки.  5,0

 

мл  полученного  раствора  помещают  в  мерную

 

колбу 

вместимостью 50

 

мл и доводят объем раствора метанолом до метки.

 

Полученный  раствор  содержит  эквивалент  0,03

 

%  раствора 

стрептомицина

 

В (1

 

мг 

D

-

маннозы соответствует 4,13

 

мг стрептомицина

 

В).

 

Раствор  для  проверки  пригодности  хроматографической  системы

Смешивают по 1

 

мл испытуемого и стандартного

 

растворов.

 

На линию старта пластинки наносят по 10

 

мкл испытуемого

 

раствора, 

стандартного  раствора  и  раствора  для  проверки  пригодности 
хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на 
воздухе,  помещают  в  камеру  с  ПФ  и  хроматографируют  восходящим 
способом, предварительно насыщая камеру парами растворителей в

 

течение 

не менее 12

 

ч. Когда фронт ПФ пройдет около 80

 – 90 

% длины пластинки от 

линии  старта,  ее  вынимают  из  камеры,  сушат  до  удаления  следов 
растворителей и опрыскивают свежеприготовленной смесью

 

равных объемов 

0,2 

%  раствора

  1,3-

дигидроксинафталина  в  спирте  96

 % 

и  20

 

%  раствора 

серной кислоты. Пластинку выдерживают при

 

температуре 110

 

°С в течение 

мин, охлаждают и просматривают при дневном свете.

 

4821